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本文以容县杨梅和荸荠杨梅的种子以及东魁杨梅的茎尖、半木质化茎段和未木质化茎段作为试验材料,以MS培养基为基本培养基,研究了浓硫酸软化种皮的预处理时间、种子的不同消毒灭菌剂处理、不同茎段部位和不同防褐化措施对外植体离体培养的影响;不同外植体愈伤组织的诱导;未木质化茎段直接诱导无菌芽、无菌苗的生根和移栽。试验结果如下:
1.浓硫酸(98%)对容县杨梅种子预处理4min和荸荠杨梅种子预处理5min,两个品种的种子发芽率均达到50%。
2.以0.1%HgC12灭菌处理容县杨梅种子和荸荠杨梅种子15min效果最好,容县杨梅种子污染率为25.0%,出芽率为58.33%;而荸荠杨梅种子污染率为29.17%,出芽率为50.00%。
3.容县杨梅种子无菌苗继代培养基以NAA0.1mg·L-1+6-BA1.5mg·L-1对芽的继代增殖效果最好,芽增殖倍数为3.1倍。
4.用0.1%HgC12对东魁杨梅茎段外植体灭菌处理时间为7min效果最好,污染率为30%,诱导率达40%。
5.同一灭菌处理对茎尖、未木质化茎段和半木质化茎段3个部位灭菌效果不同。以半木质化效果好,污染率为30.00%,芽诱导率为36.67%。
6.6-BA1.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+TDZ0.04mg·L-1的组合比KT1.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+TDZ0.06mg·L-1组合对芽继代增殖诱导的效果较好,芽增殖倍数为3.86倍。
7.在2,4-D3.0mg·L-1的诱导条件下,东魁杨梅茎尖愈伤组织诱导率为100%,明显高于茎段和叶片。
8.以活性炭1.2g·L-1+PVP 2.5g·L-1的组合比单因子活性炭或者PVP对东魁杨梅外植体防褐化效果较好,褐化率是25.0%,芽诱导率为45.31%。
9.1.5mg·L-1的IBA对无菌苗生根效果较好,生根率达59.8%,平均根数3.05条,平均根长2.3cm。
10.以泥炭土+菜园土(2:1)基质组合比较适合东魁杨梅无菌苗的移栽,其成活率达到84.4%。