尼达尼布是一种血小板源性生长因子受体(Platelet-derived growth factor receptors,PDGFR)、血管内皮生长因子受体(Vascular endothelial growth factor receptors,VEGFR)、成纤维细胞生长因子受体(Fibroblast growth factor receptors,FGFR)三联血管激酶抑制剂。到目前为止,FDA批准了三个适应症:特发性肺纤维化(Idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)、慢性纤维化性间质性肺病(Chronic fibrosing interstitial lung disease,ILDs)及系统性硬化相关间质性肺病(Systemic sclerosis-associated interstitial lung disease,SSc-ILD)。由于 IPF 发病机制不明,且其它 PDGFR、VEGFR、FGFR抑制剂都不具有抗IPF的作用,尼达尼布抗IPF的直接作用靶标仍不明确。本课题在尼达尼布构效关系基础上,设计、合成了 5个探针分子:P1-P5。通过生物活性评价获得了活性保留的光亲和探针P2,P3,利用胶内荧光成像实验确证了探针的光标记能力,并且对探针的浓度、孵育时间进行了优化。竞争性结合实验表明探针与尼达尼布结合相同的分子靶标。利用基于亲和性的蛋白质分析技术(Affinity-based protein profiling,AfBPP),我们采用探针P3在人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)内进行了靶标垂钓,并利用生物质谱进行靶标鉴定。通过分析质谱数据,我们首次鉴定到三肽基肽酶1(Tripeptidyl-peptidase 1,TPP1)是尼达尼布的潜在直接作用靶标。Western blot验证结果表明TPP1与尼达尼布存在直接相互作用,共聚焦荧光显微镜实验表明探针与TPP1存在共定位,分子对接结果显示尼达尼布可以占据TPP1招募端粒酶的活性口袋TPP1-OB结构域,并与其中的关键氨基酸残基形成相互作用。端粒酶调控与细胞增殖、IPF发生密切相关,尼达尼布可能通过结合TPP1,影响端粒酶招募,进而介导其抗IPF作用。此外,采用相同的技术策略与分析流程,我们利用探针P2在人肺成纤维细胞(HPF)内进行了尼达尼布结合蛋白的鉴定。结果表明,盘状结构域受体 2(Discoidindomain-containingreceptor2,DDR2)与 TANK 结合激酶1(TANK-binding kinase 1,TBK1)是尼达尼布的高置信度潜在分子靶标,两者富集程度在竞争组下调最为明显,且均与细胞增殖、IPF表型高度相关,值得进行深入研究。本课题利用AfBPP技术首次发现血管激酶之外的尼达尼布新靶标TPP1及潜在靶标DDR2、TBK1。这些新发现的分子靶标增加了我们对尼达尼布作用机制的理解,为IPF、ILDs、SSc-ILD等疾病的治疗提供了新的启示。药物分子多存在多晶型现象,是影响药品质量与疗效的重要因素。2’,3’,5’-三-O-乙酰基-N6-(3-羟基苯基)腺苷(IMM-H007)由天然产物虫草素改造而来,临床研究显示其降血脂作用良好。本文对IMM-H007的多晶型现象进行了研究,首先通过晶型筛选,发现其存在两种晶型状态,并通过适当的方法制备得到了H、L两种晶型。采用多种技术手段对晶型进行表征,热重分析结果显示两种晶型均为非溶剂晶型,粉末X射线衍射法、差示扫描量热法、红外光谱法均可实现不同晶型的鉴别。通过培养单晶,我们确定了 IMM-H007的绝对构型及H晶型的晶体参数。在加速试验条件下,两种晶型均具有良好的稳定性。药代动力学研究显示,两种晶型的生物利用度存在较大差异,H晶型显著优于L晶型。