血IL-6、8及MMP-9表达水平在宫内感染所致新生鼠肺损伤中的意义

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目的:采用腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的方法构建稳定的宫内感染的孕鼠模型,通过肺组织病理切片了解宫内感染对肺部组织造成的损伤程度,监测新生鼠血中IL-6、IL-8、MMP9的浓度,探究前述炎症因子对预测肺部疾病的价值。方法:宫内感染组:孕18天的孕鼠18只,分别于宫腔内注射合适浓度的LPS(0.6、0.7、0.8、0.9、1.0mg/kg)。对照组:孕18天的孕鼠3只,于宫腔内注射和感染组LPS等量的灭菌生理盐水。查看自然分娩的新生大鼠存活数量,每只均擦干称重,再与分娩母鼠共同饲养,记录每天不同时刻新生大鼠的呼吸频率、动度以及有无发绀等异常情况;首先收集自然分娩后胎盘(自然分娩下收集胎盘容易失败,可选择择期剖宫产收集新鲜胎盘);按照1、3、7日龄分别随机选取两组中自然分娩所得的每窝新生大鼠中的8只新生大鼠,每组每个时间点共48份肺组织标本。将随机选取的新生大鼠断头取血(心脏取血或眼球内眦取血),留取血标本用于ELISA实验;处死后迅速取出肺组织,将所取的胎盘与肺均进行HE染色制成切片备用。比较实验组与对照组中随着药物剂量递减孕鼠死亡率、流产率以及新生大鼠死亡率的变化,比较不同LPS组新生鼠胎盘及肺病理评分、新生鼠体重/肺重、ELISA法监测胎鼠血中的IL-6、IL-8、MMP-9表达差异有无统计学意义。结果:(1)注射LPS浓度大于0.7mg/kg时,各组胎盘病理与对照组相比较差异有统计学意义(P<0.05),胎盘病理可见存在炎症细胞开始浸润绒毛膜羊膜,且注射孕鼠LPS浓度越高,炎症细胞愈多,浸润组织部位越多。(2)通过注射不同浓度LPS造成肺部炎症浸润的程度也不相同,不同组炎症评分与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),提示宫内感染可造成肺部炎症,当注射LPS浓度越高,肺部组织炎症细胞浸润越多,肺部组织破坏越多,新生大鼠肺部损伤越重,并且这种损伤会持续至生后7天左右。(3)注射不同浓度LPS的新生大鼠每天呼吸情况及生长指标相比较,实验组与对照组新生大鼠呼吸频率与体重/肺重相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(4)与对照组比较,实验组新生鼠血中IL-6、IL-8、MMP-9的浓度差异有统计学意义(P<0.05),并且随着注射LPS浓度的增高,新生鼠血IL-6、IL-8、MMP-9的浓度也越来越高。结论:SD大鼠孕18 d腹腔注射LPS可导致孕鼠宫内感染,且在注射LPS浓度为0.7 mg/kg时,可制作稳定的宫内感染的模型,同时当注射LPS浓度大于或等于0.7 mg/kg时可造成新生鼠肺病理损害、肺水肿,且这种损害会持续至生后7天,血中的炎症因子IL-6、IL-8、MMP-9也会增高,这对研究预测宫内感染肺部疾病有着重要价值。
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