【摘 要】
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棉花黄萎病是由大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb)引起的危害比较严重的土传病害。目前,以生物防治为主的综合防治措施越来越受到人们的关注,在棉花黄萎病的防治中有着极
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棉花黄萎病是由大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb)引起的危害比较严重的土传病害。目前,以生物防治为主的综合防治措施越来越受到人们的关注,在棉花黄萎病的防治中有着极其重要的意义。棉花黄萎病的生物防治措施中尤以微生物杀菌剂防治为重要途径。枯草芽胞杆菌NCD-2菌株是一株从棉花根际土壤中分离得到的拮抗菌株,对棉花黄萎病表现出比较理想的防治效果。以该菌株为有效成分的微生物农药已通过国家农药正式登记(PD20101654)。本试验采用室内模拟方法,探讨滴灌条件下枯草芽胞杆菌NCD-2菌株在土壤、棉花根际和根表土壤中的种群动态,以及对棉花黄萎病的防治效果。取得了以下研究结果:(1)利用枯草芽胞杆菌NCD-2菌株为材料,通过浓度梯度诱导筛选出一株能在含300μg/mL利福平培养基上正常生长的标记菌株NCD-2Rif,该菌株的菌落形态和生长曲线与野生菌株无显著差异。(2)采用抗性平板菌落计数法,检测抗性菌株NCD-2Rif在不同深层土壤中的数量变化情况。结果表明,标记菌株NCD-2Rif通过滴灌方式滴到土壤后,其菌量随着滴灌时间和土壤深度的不同而不同。在滴灌后第21 d,5 cm和10 cm处菌体数量达到峰值,之后菌体数量急剧下降;5 cm土层中菌体数量在滴灌35 d后趋于稳定;10 cm土层中菌体数量在滴灌28 d后趋于稳定。在滴灌第14 d后,15 cm和20 cm处菌量达到峰值,之后菌体数量急剧下降;15 cm土层中菌体数量在滴灌21 d后趋于稳定;20 cm土层中菌体数量在滴灌35 d后趋于稳定。在滴灌后的第1 d,25 cm和30 cm处的菌体数量即达到峰值,之后菌体数量急剧下降;25 cm土层中菌体数量在滴灌35d后趋于稳定;30 cm处菌体数量在滴灌28 d后趋于稳定。随着土壤深度加深,土壤中标记菌株NCD-2Rif的菌体数量呈下降趋势;随着取样时间的延长,各层土壤中标记菌株NCD-2Rif的菌体数量也呈下降趋势。(3)通过抗生素抗性标记法结合盆栽试验,以滴灌的方式接种标记菌株NCD-2Rif,并于接种后的不同时间检测该标记菌株NCD-2Rif在棉花根际土和根表中的定殖数量。结果表明,标记菌株NCD-2Rif在棉花根际土与根表中均能够定殖,接种后第1 d该菌株在根际土和根表中的菌体数量达到峰值;接种35 d后,标记菌株NCD-2Rif在根际土和根表中的定殖量仍然能达到较高水平,同时发现该标记菌株NCD-2Rif在棉花根际土的菌体数量高于在根表中的数量;随着时间的延长,棉花根际土壤中标记菌株NCD-2Rif的菌体数量急剧下降,而根表上标记菌株NCD-2Rif的菌体数量下降平缓。(4)利用盆栽试验检测滴灌条件下枯草芽胞杆菌NCD-2可湿性粉剂对棉花黄萎病的防治效果。在明确其安全使用剂量的基础上,检测不同滴灌剂量对棉花黄萎病的防治效果。采用5 kg/亩、3 kg/亩和1 kg/亩不同剂量生防菌剂滴灌处理后,其出苗率分别为84.38%、80.73%和79.17%,三个处理间出苗率差异不显著,与空白对照相比,5 kg/亩和3 kg/亩处理的棉花出苗率显著提高,1 kg/亩处理的棉花的苗率差异不显著,说明该制剂所使用的剂量均对棉花安全。防效测定结果表明,5 kg/亩生防菌剂使用剂量的防治效果最高,为40.19%,3 kg/亩的防治效果为23.95%,1 kg/亩的防治效果为15.50%,说明随着生防菌剂使用剂量的提高,其对棉花黄萎病的防治效果呈提高的趋势。
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