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本研究对实验室分离保存的猪繁殖与呼吸综合征病毒PPO3的理化特性和毒力性状的稳定性进行了测试。将PPO3病毒在-75℃下保存3年后,再经传代弱化,后续试验结果显示:该毒株在56℃下感作30min可被迅速灭活;氯仿等有机溶剂可迅速破环其囊膜结构;BUDR不影响病毒的有效增殖与复制;其在Marc-145细胞上形成以细胞圆缩、葡萄状聚集和大面积脱落为特征的细胞病变（接毒量为0.5mL/瓶）,这与3年前陈杰的试验结果基本一致。病毒在pH6.0～7.2时,毒力稳定,但随着传代次数的增多,该毒株对酸性环境（pH＜5.5）的耐受性逐渐增强,细胞病变产生时间由原来的5天缩短为3-4天。通过对PPO3传代55代次,提取病毒的表面蛋白,经SDS-PAGE得到46.1KD、40KD、37.5KD、17.5KD和15.7KD的5条主要抗原蛋白条带,与原PPO3毒株的主要抗原蛋白基本一致。表明PPO3病毒表面蛋白稳定。此外,通过对ORF6保守基因序列分析,设计合成了1对引物,并筛选出了最佳反应条件:95℃预变性5 min;95℃30s,56℃30s,72℃35s,进行35个循环,最后72℃延伸10min,成功获得了分子量为350 bp的特异性目的片段;而同时对HCV、PRV、PPV及Marc-145细胞进行同条件检测,结果均为阴性,从而进一步证实了PPO3为一株猪繁殖与呼吸综合征病毒。传代试验结果显示,PPO3病毒在Marc-145细胞上连续传代55代次后,其TCID50为10-4..56/0.1mL,比原毒株(TCID50为10-3.6/0.1mL)对MARC-145细胞的感染性增强（P＜0.05）,差异显著。但抗体中和试验结果发现,经55代次的连续传代后,PPO3病毒对于抗体的中和效价有所增高,其抗体中和效价为1/7,而原PPO3毒株（保存3年的）的抗体中和效价为1/37,差异显著（P＜0.05）。本研究经纯化病毒,制作病毒抗原和高免血清（标准毒株制备）,建立了间接ELISA诊断检测方法。经正交试验,最终确定抗原的最佳稀释度为1:40,抗体的最佳稀释度为1:5,阳性标准OD值为0.362,阴性值为0.019,空白对照值为0.004,标准SP值为0.4,并建立了PPO3 ELISA检测的标准曲线。通过对20个临床样品的检测,其中样品阳性血清检出率为80%,阴性检出率为20%,基本符合该猪场的实际情况。