稻瘟病是由水稻稻瘟病菌引起的一种真菌病害，严重影响水稻产量。由于具有稻瘟病抗性的水稻品种抗性易于丢失，化学农药防治稻瘟病造成环境污染，因此稻瘟病的生物防治研究具有重要意义。枯草芽孢杆菌BS501a是从稻田土壤中分离出来的一株对稻瘟病菌有良好拮抗活性的细菌，具有很好的应用前景。本实验对枯草芽孢杆菌BS501a发酵工艺进行优化，提高其拮抗活性，降低生产成本，为规模化生产奠定基础。本研究从发酵培养基和发酵条件两方面对枯草芽孢杆菌BS501a的发酵工艺进行优化。首先利用单次单因素试验筛选最适碳源为大豆粕，最适氮源为花生饼粉，然后采用Plackett-Burman（PB）试验筛选出影响拮抗活性的显著因素为大豆粕、花生饼粉、KH₂PO₄。利用中心组合试验对PB试验筛选出的三个显著影响因素进一步优化，获得最佳发酵培养基和发酵条件：大豆粕3.2%，花生饼粉1.21%，酵母膏0.5%，KH₂PO₄0.07%，K₂HPO₄0.2%，MgSO₄·7H₂O0.05%，MnSO₄·H₂O0.01%，FeSO₄·7H₂O0.01%，CaCl₂0.15%，初始pH为7.2，接种量5%，培养温度37℃，装瓶量为100mL/500mL。该条件下BS501a的拮抗活性可达91.6%，比优化前提高了26.7%，与基础培养基相比提高了6%；优化后培养基生产成本每吨降低900元。本实验研究了枯草芽孢杆菌BS501a发酵液拮抗稳定性，结果显示在低于45℃条件下保存10d，菌丝生长抑制率仅下降2.3%，而当外界环境温度高于60℃时，10d后菌丝生长抑制率下降27.3%；发酵液在pH7⁹条件下活性较强，发酵液中拮抗活性物质在碱性条件下可溶于水，在酸性条件下呈不溶性沉淀；在光照强度4500±500lx下光照10d，菌丝生长抑制率仅下降0.7%；发酵液中的拮抗活性物质不能被蛋白酶K降解。综上所述，枯草芽孢杆菌BS501a发酵液中拮抗活性物质理化性质稳定。将枯草芽孢杆菌BS501a转接10代，其发酵液菌丝生长抑制率仅下降0.3%，说明枯草芽孢杆菌BS501a遗传稳定性良好。温室条件下研究枯草芽孢杆菌BS501a对稻瘟病菌的防治效果。结果表明，枯草芽孢杆菌BS501a对稻瘟病菌有良好的防治效果，防治效率为63.8%，是一株具有应用价值的生防细菌。