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[目的]研究灵芝多糖对二乙基亚硝胺(DEN)诱导小鼠肝脏组织形态和原癌基因H-ras、myc及抑癌基因p53、Rb1mRNA表达量的影响,进而从分子水平探讨灵芝多糖的抗癌机理。[方法](1)体外抗氧化活性以测定其总还原力、DPPH·、O2-·、·OH、H2O2的清除能力为指标。(2)选用4周龄清洁级昆明小鼠随机分为6组,每组10只,雌雄各半。分别为空白对照组、模型组、多糖组、低剂量试验组(DEN+50mg/kg-d多糖)、中剂量试验组(DEN+100mg/kg-d多糖)、高剂量试验组(DEN+200mg/kg-d多糖)。模型组、DEN+多糖试验组分别给予100mg/L的DEN溶液,自由饮用。饲喂45d后,采集肝脏,制备常规HE染色切片,观察灵芝多糖对二乙基亚硝胺诱导小鼠组织形态的影响。并且提取小鼠肝脏RNA用荧光定量RT-PCR法检测原癌基因H-ras、myc及抑癌基因p53、Rb1mRNA的相对表达量。[结果]1、灵芝多糖具有一定的抗氧化能力,当浓度达到2mg/mL时,还原力吸光度为1.237, DPPH·、O2-·、·OH、H2O2的清除率分别为89.3%、43.99%、89%、94.32%。2、对照组和多糖组小鼠肝细胞围绕中央静呈放射状排列,且排列整齐。胞浆均质红染,细胞核蓝染清楚且呈椭圆形,无核分裂相。而DEN组小鼠肝细胞排列紊乱,有的肝细胞发生肿胀,甚至胀破,细胞核碎裂,甚至胞浆中有空泡,且有微细的淡红染的蛋白质颗粒(为肝的颗粒变性),由于肝细胞肿胀,肝窦变窄,导致局部组织缺血。与DEN组相比,试验组小鼠肝脏随着灵芝多糖剂量的增加,小鼠肝脏损伤程度减轻。3、与空白对照组相比,原癌基因H-ras、myc mRNA的表达量,多糖对照组均下降,但差异不显著；DEN模型组分别升高83.2%、57.4%,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。与DEN模型组相比,随着试验组多糖浓度的增加,原癌基因H-ras、myc mRNA的表达量逐渐降低,低剂量组分别下降36.3%、31.2%,中剂量组分别下降45.9%、40.1%,高剂量组分别下降50.6%、41.8%,差异均达到极显著水平(P<0.01)。与正常对照组相比,抑癌基因Rb1、p53mRNA的表达量,多糖对照组分别升高23.7%、14.5%,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)；DEN模型组分别升高11.6%、9.7%,差异均显著(P<0.05)。与DEN模型组相比,随着试验组多糖浓度的增加,抑癌基因Rb1、p53mRNA的表达量逐渐升高,低剂量组分别升高5.7%、9.6%,差异不显著或达到显著水平(P<0.05),中剂量组分别升高9.0%、24.1%,差异显著或达到极显著水平(P<0.05或P<0.01),高剂量组分别升高14.6%、43.4%,差异都达到极显著水平(P<0.01)。[结论]灵芝多糖具有一定的抗氧化能力,对二乙基亚硝胺引起的小鼠肝脏损伤具有缓解作用,并可以抑制原癌基因的表达,提高抑癌基因的表达,说明灵芝多糖在一定程度上可以通过对原癌基因和抑癌基因的调控抑制癌症的发生或发展。