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目的:1.分析小鼠肝脏缺血再灌注（Ischemia and reperfusion,I/R）动物模型中,肝脏组织内ROS和NEK7表达水平的相关性;2.观察NEK7对I/R体内模型中,NLRP3炎性小体相关蛋白表达、炎性因子分泌、肝脏功能、肝脏组织学改变和肝功能损伤程度的影响;3.探讨NEK7参与ROS对肝脏库普弗细胞（Kupffer cells,KCs）中NLRP3的调控作用以及其影响肝脏缺血再灌注损伤（Ischemia and reperfusion injury,IRI）的分子机制。方法:首先建立C57BL/6J小鼠肝I/R体内模型及RAW264.7（KCs替代细胞株）经缺氧复氧（Hypoxia and reoxygenation,H/R）处理的I/R体外模型。western-blot检测肝组织相关蛋白表达,ELISA检测血清炎性因子IL-1β和IL-18的水平,微板法检测血清AST和ALT的水平,DCFH-CA法标记流式细胞术检测肝脏组织中ROS的表达,HE染色分析肝组织损伤,TUNEL染色评估肝脏组织细胞凋亡情况,免疫荧光双标NEK7和F4/80或CK18,观察肝组织中NEK7蛋白在肝细胞和肝脏KCs的定位。结果:1.与Sham组相比,I1R3、I1R6和I1R9组ROS、NEK7、NLRP3、Cleaved-caspase-1、AST、ALT、IL-1β和IL-18的表达上调,且随着再灌注的时间延长,它们的表达逐渐增加。2.Pearson相关性分析,结果示,肝脏组织中ROS与NEK7的表达呈正相关（p<0.0001,r=0.8501）。3.免疫荧光双标结果示,肝脏组织中NEK7与F4/80重合,而与CK18不重合。4.与I/R组相比,I/R+siNEK7组NEK7、Cleaved-caspase-1、AST、ALT、IL-1β和IL-18的表达下调（p<0.01;p<0.01;p<0.05;p<0.05;p<0.05;p<0.05）,肝脏组织损伤和细胞凋亡减少,而I/R+siRNA control组各项指标无差异改变。值得注意的是,NLRP3和ROS的表达在三组中无差异（p>0.05）。5.与control组相比,H/R组细胞内ROS、NEK7、NLRP3和Cleaved-caspase-1的表达显著升高,细胞上清中炎性因子IL-1β和IL-18的释放增加,差异有统计学意义（p<0.05;p<0.01;p<0.001;p<0.001;p<0.001;p<0.001）。与H/R组相比,H/R+siNEK7组细胞内NEK7和Cleaved-caspase-1的表达显著降低,细胞上清中炎性因子IL-1β和IL-18的释放减少,差异有统计学意义（p<0.001;p<0.001;p<0.001;p<0.001）,而ROS和NLRP3的表达无明显差异,差异无统计学意义（p>0.05）。6.与H/R组相比,H/R+siNLRP3组细胞内NLRP3和Cleaved-caspase-1的表达显著降低,细胞上清中炎性因子IL-1β和IL-18的释放减少,差异有统计学意义（p<0.001;p<0.001;p<0.001;p<0.001）;而NEK7的表达无明显差异,差异无统计学意义（p>0.05）。7.与H/R组相比,H/R+Ac-YVAD-CMK（caspase-1选择性抑制剂）组细胞内Cleaved-caspase-1的表达显著降低,细胞上清中炎性因子IL-1β和IL-18的释放减少,差异有统计学意义（p<0.001;p<0.001;p<0.001）;而NLRP3和NEK7的表达无明显差异,差异无统计学意义（p>0.05）。8.与allopurinol组相比,allopurinol+rNEK7组细胞中NEK7蛋白表达增加（p<0.001）,而NLRP3和Cleaved-caspase-1蛋白表达、细胞上清中炎性因子IL-1β和IL-18的释放无差异（p>0.05）。与H2O2组比较,H2O2+siNEK7组细胞中NEK7和Cleaved-caspase-1蛋白表达降低,细胞上清中炎性因子IL-1β和IL-18的释放减少（p<0.001）,而细胞中的NLRP3蛋白表达不变（p>0.05）。结论:1.小鼠I/R模型中,肝组织内ROS与NEK7的表达呈正相关。2.NEK7参与正性调控小鼠IRI,且这一作用主要由肝脏KCs中的NEK7而不是肝细胞中的NEK7所介导。3.抑制NEK7的表达,可以通过抑制炎症小体NLRP3的激活,减少炎症因子的释放,改善肝缺血再灌注后的肝功能、减轻肝组织损伤和减少肝细胞凋亡。4.NEK7是ROS激活NLRP3炎症小体引起肝脏IRI的关键分子。