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目的:脑血管病是常见病、多发病,通常急性起病,留下严重的并发症,以其极高的致死率和致残率危害人类的生命,其中缺血性脑卒中占全部脑血管病的70%。体温是影响脑缺血预后的一个重要因素,发热通过多种机制可直接或间接地与卒中相关。近来,大量基础及临床研究发现,亚低温对脑缺血有明显的保护作用,但其具体机制尚不完全清楚。低温可在不同方面抑制神经元缺血损伤的各种途径,从而有望成为脑缺血治疗的有效方法。生存素-Survivin,属于凋亡抑制蛋白中的一员,具有重要的抑凋亡作用。因为Survivin的独特分布特点,近来对其研究多局限于肿瘤治疗方面,脑缺血损伤后引起的神经元凋亡是否有Survivin的表达,文献报道较少。Bcl-2是首先从滤泡性淋巴瘤中分离出来的,现已证实它是抑制组织细胞凋亡的基因,这些细胞包括肿瘤细胞、心肌细胞、血管内皮细胞、神经细胞等。本实验通过对脑缺血的动物模型实施亚低温治疗,观察Bcl-2表达,试阐述低温的抑制凋亡机制,并观察神经细胞中是否有Survivin的表达。方法:SD雄性大鼠54只,随机分为2大组:假手术组-PS组(18只)和缺血模型组-IS组(36只);缺血模型组再分2亚组,分别为常温组-NO组和亚低温组-HY组;各亚组分3个时间点:12、24、48h,各时间点为6只。模型制作:采用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉梗塞模型,低温组应用冰块对大鼠大脑病变侧予以亚低温治疗,维持体温在32-34°C,持续4-6h,之后缓慢复温。常温组维持体温在初始温度。假手术组只麻醉后暴露血管,不插线。术后在各个时间点应用三种方法进行神经功能评分,之后过量麻醉处死大鼠,取脑,将脑组织冠状切成6个间隔2mm的脑片,其中第4片用4%多聚甲醛固定,24h后石蜡包埋并切成6μm的组织切片。这些切片部分进行HE染色用以组织病理学分析,部分常规免疫组化染色观察survivin和bcl-2的表达。其余脑片给予TTC染色后固定,计算梗塞体积。结果1神经功能评分结果显示:低温组(2.17±0.75)大鼠行为功能缺陷较常温组(3.17±0.75)明显改善,差异有显著意义,P<0.05。2脑组织切片HE染色光镜下观察:在缺血低温组和常温组中,大鼠右侧大脑中动脉供血区可见染色欠佳的梗死区。在这些脑区发现大脑中动脉及小动脉内皮细胞损伤并有血栓形成,皮层和海马区的神经元胞核皱缩,胞浆空泡化。而假手术组没有梗死灶,神经元胞浆饱满,染色均匀。3 TTC染色结果显示:缺血低温组(0.12±0.02)的梗塞体积较常温组(0.15±0.01)显著减小,差异有统计学意义,P<0.05。4免疫组织化学结果显示:Bcl-2在缺血12h即在梗死区的周边显著表达,主要定位于神经元的核膜和胞膜上,胞浆少见。与常温组(57.30±3.39)的阳性细胞数比较,低温组(72.83±4.58)显著增加,而假手术组(6.83±4.31)的表达甚少,差异有统计学意义,P<0.05。Survivin在缺血区的周边也有表达,主要定位于神经元的胞浆中和小血管内皮细胞上。与常温组(35.83±4.58)比较,低温组(69.33±8.69)显著增加,而假手术组(5.32±1.02)的表达甚少,差异有统计学意义,P<0.05。结论1亚低温(33～35°C)是有效的神经保护措施,可以通过促进Bcl-2和survivin的表达、影响神经元相关基因的表达等机制,减少脑缺血后神经元凋亡,继而起到脑保护作用。2 survivin作为抗凋亡家族的新成员,可以在脑缺血缺氧损伤后表达。3 Bcl-2与survivin表达趋势相似,两者通过不同的凋亡抑制途径协同地保护受损脑组织。