血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)与高脂血症性急性胰腺炎的相关性研究

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第一部分高脂血症急性胰腺炎大鼠模型建立目的构建稳定的高脂血症急性胰腺炎(hyperlipidemic acute pancreatitis,HLAP)大鼠模型。观察HLAP大鼠模型的病理生理变化,探讨高脂血症(hyperlipemia,HL)对AP大鼠的影响。方法80只雄性SD大鼠随机被分为四组:正常组(n=20)、HL组(n=20)、SAP组(n=20)、HLAP组(n=20)。自制脂肪乳剂灌胃喂养大鼠2周构建HL动物模型,3.5%牛磺胆酸钠溶逆行胰胆管注射液诱发急性重症胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)。模型建立后观察各组大鼠一般情况,6小时后取各组大鼠血液及胰腺标本,测定大鼠血清甘油三脂、总胆固醇、淀粉酶含量,显微镜下对比观察大鼠胰腺组织的HE染色病理变化。结果HL组与HLAP组大鼠血清甘油三脂和胆固醇值较正常组与SAP组升高,差异均有统计学意义(p<0.05)。牛磺胆酸钠注射组大鼠血清淀粉酶量较正常组及HL组明显升高,差异有统计学意义(p<0.01),HLAP组血清淀粉酶显著低于SAP组,差异有统计学意义(p<0.05)。SAP组和HLAP组大鼠胰腺组织均出现严重炎症细胞浸润、出血、坏死,HLAP组坏死评分较SAP组升高,差异有统计学意义(p<0.05)。结论自制脂肪乳剂灌胃结合胆胰管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠可成功诱导SD大鼠建立HLAP模型,HL可加重大鼠AP模型胰腺组织的病理损害。第二部分ANGPTL3在HLAP模型中表达及对HLAP的影响目的研究血管生成素样蛋白-3(angiopoietin like protein3,ANGPTL3)与高脂血症急性胰腺炎(hyperlipidemic acute pancreatitis,HLAP)相关性,并上调ANGPTL3表达,观察对大鼠HLAP的影响。方法将120只雄性SD大鼠随机分为六组:正常组(n=20)、SAP组(n=20)、HL组(n=20)、HLAP组(n=20)、药物HL组(n=20)和药物HLAP组(n=20)。通过自制的脂肪乳剂灌胃2周构建高脂血症模型,3.5%牛磺胆酸钠溶液逆行胰胆管注射诱发急性重症胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP),药物HL组和药物HLAP组大鼠均灌胃前给予T0901317灌入。模型建立后观察各组大鼠一般情况,6小时后取各组大鼠血液、肝脏及胰腺标本,测定大鼠血清甘油三脂、总胆固醇、淀粉酶含量,实时荧光定量PCR检测肝脏Angptl3 m RNA表达量,ELISA法检测大鼠血清ANGPTL3浓度。显微镜下对比观察大鼠胰腺组织的HE染色病理变化。结果HL组和HLAP组大鼠肝脏的Angptl3 m RNA表达量与血清ANGPTL3蛋白浓度均高于正常组和SAP组,差异有统计学意义(p<0.05);HLAP组稍高于HL组,差异有统计学意义(p<0.05)。药物HL组和药物HLAP组大鼠肝脏的Angptl3 m RNA表达量与血清ANGPTL3蛋白浓度较HL组和HLAP组均明显升高,差异有统计学意义(p<0.01);药物HL组与药物HLAP组大鼠肝脏Angptl3 m RNA表达量与血清ANGPTL3蛋白浓度无差异(p>0.05)。药物HL组与药物HLAP组大鼠甘油三脂与胆固醇含量均高于HL组与HLAP组,差异有统计学意义(p<0.01)。AP模型建立后,HLAP组和药物HLAP组血清淀粉酶较HL组和药物HL组均升高,差异有统计学意义(p<0.05);HLAP组和药物HLAP组胰腺组织均出现严重的炎症细胞的浸润、出血、坏死表现,药物HLAP组坏死评分高于HLAP组,且差异有统计学意义(p<0.05)。结论大鼠Angptl3基因与HLAP有一定相关性,HLAP大鼠模型Angptl3基因高表达。T0901317可上调大鼠体内Angptl3基因的表达;上调大鼠体内Angptl3基因表达可加重HLAP胰腺组织坏死。第三部分胰岛素在高脂血症急性胰腺炎患者治疗中的作用目的探讨胰岛素在高脂血症性急性胰腺炎(hyperlipidemic acute pancreatitis,HLAP)中的降脂作用与预后的关系,及对外周血血清血管生成素样蛋白3(angiopoietin like protein3,ANGPTL3)表达量的影响。方法HLAP患者40例,入院时甘油三酯水平均>5.65mmol/L。根据入院血糖是否大于10 mmol/L分为胰岛素治疗组(22例)和常规治疗组(18例),观察两组甘油三酯下降水平、腹痛消失和肠功能恢复时间、并发症及住院时间等。入院时及治疗结束分别抽取患者外周血,ELISA法检测血清ANGPTL3蛋白表达量。结果胰岛素治疗组在甘油三酯水平下降低于5.65mmol/L、腹痛消失及肠功能恢复时间分别为:(3.41±1.74)d、(3.64±1.43)d和(8.09±2.81)d较常规治疗组(5.89±1.37)d、(5.28±1.36)d和(10.00±2.72)d显著缩短,差异有统计学意义(p<0.05);而住院时间胰岛素治疗组为(31.1±28.2)d,较常规治疗组(19.7±6.1)d差异无统计学意义(p>0.05),除胰岛素治疗组1例死于继发真菌血症外,余患者经均顺利出院。两组并发症与病死率差异无统计学意义(p>0.05)。入院时,常规治疗组患者血清ANGPTL3浓度为683.18±206.37ng/ml与胰岛素治疗组患者703.45±264.68ng/ml,无统计学差异(p>0.05);常规治疗组患者治疗后血清ANGPTL3浓度为458.74±127.64ng/ml,较入院时血清ANGPTL3浓度明显降低,差异有统计学意义(p<0.01);胰岛素组患者治疗后血清ANGPTL3浓度为295.74±69.68 ng/ml,较入院时血清ANGPTL3浓度明显降低,差异有统计学意义(p<0.01);经治疗后胰岛素组患者血清ANGPTL3浓度较常规组明显降低,差异有统计学意义(p<0.05)。结论静脉胰岛素降脂治疗能迅速降低甘油三酯水平、缓解腹部疼痛、缩短肠功能恢复的时间,但不能缩短住院时间和改善预后。胰岛素可通过减少HLAP患者体内ANGPTL3来降低血清甘油三酯水平。
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