【摘 要】
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养殖水体中包含大量的致病微生物,鱼体的黏膜表面直接与水体接触,最易受到致病菌的感染。鱼类黏膜相关淋巴组织(Mucosal-associated lymphoid tissues,MALTs)构成机体保护的第一道防线。其中,鳃和鼻相关淋巴组织(Gill-associated lymphoid tissue,GIALT;Nasal-associated lymphoid tissue,NALT)是硬骨
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养殖水体中包含大量的致病微生物,鱼体的黏膜表面直接与水体接触,最易受到致病菌的感染。鱼类黏膜相关淋巴组织(Mucosal-associated lymphoid tissues,MALTs)构成机体保护的第一道防线。其中,鳃和鼻相关淋巴组织(Gill-associated lymphoid tissue,GIALT;Nasal-associated lymphoid tissue,NALT)是硬骨鱼黏膜屏障的重要组成部分。鳃作为硬骨鱼类重要的呼吸器官,在执行气体交换的过程中不断与水体中的病原体接触,其GIALT构成的机体保护防线作用尤为重要。在哺乳动物的呼吸道中,MALTs被认为是抵御病毒感染的第一道防线,分泌型Ig A(secretory Ig A,s Ig A)是重要的体液免疫分子,可以中和呼吸道病毒,阻止病毒附着和入侵上皮细胞,从而保护黏膜表面。而关于硬骨鱼免疫球蛋白(Immunoglobulins,Igs)在呼吸系统中抗病毒感染的作用研究较少。本文探究了虹鳟(Oncorhynchus mykiss)鳃黏膜Igs和B细胞在传染性造血器官坏死病毒(Infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV)感染后的应答。结果显示,IHNV感染虹鳟后,鳃黏膜中白细胞大量增加,抗病毒相关基因的转录水平显著升高,Ig T+B细胞可以在鳃组织中局部增殖以及虹鳟鳃黏液中产生了针对病毒特异性的Ig T效价,首次证明了鳃黏液中s Ig T具有中和病毒的作用。本研究揭示鱼类和四足类黏膜Igs在抗病毒功能中具有保守性。许多病原体可以通过鼻腔途径感染动物宿主。硬骨鱼NALT已经形成了有效的免疫屏障,但是关于Igs在NALT中抗细菌感染的免疫应答未见报道。本研究设计了柱状黄杆菌(Flavobacterium columnare)浸泡感染虹鳟实验,结果发现细菌可以侵入到虹鳟的鼻腔,造成鼻腔组织形态的变化以及炎症相关基因的应答。细菌感染后,虹鳟鼻腔中Ig T+B细胞大量增加,鼻黏液中产生较高的细菌特异性Ig T效价。以上结果表明细菌感染引起了虹鳟鼻腔局部的适应性免疫应答。三种免疫策略的裱糊效果显示,鼻腔免疫和注射免疫都可以达到很好的保护效果,但是浸泡免疫只能提供短暂的保护。哺乳动物的NALT由组织型(O-NALT)和弥散型(D-NALT)的结构组成。硬骨鱼的NALT一直被认为只存在弥散型的淋巴结构,那么其是否具有O-NALT呢?直到最近,在虹鳟的鼻腔中发现了一个聚集着大量淋巴细胞(如CD8α+T,Ig M+B细胞)的区域。将该结构命名为O-NALT。虹鳟鼻腔O-NALT中T细胞和Ig M+B细胞表面标志基因的转录水平明显高于D-NALT,表明两个区域在免疫应答方面的存在差异。O-NALT和D-NALT两个区域都可以摄取鳗弧菌抗原。通过鼻腔途径免疫虹鳟,结果显示:免疫后1天,虹鳟鼻腔O-NALT中CD8α+T细胞和Ig M+B细胞的数量显著增加,免疫后90天Ig T+B细胞的数量略有增加,但并不显著。并且在免疫1天后,O-NALT和D-NALT中CCL19的表达均显著升高。本实验首次发现虹鳟鼻腔中存在O-NALT,并且在鼻腔疫苗接种后产生强烈的免疫反应,补充了人们对硬骨鱼类NALT功能的理解,有利于制定更好的鲑科鱼类鼻腔免疫策略。
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