目的探讨亲环素A（CypA）在游离二氧化硅（SiO₂）诱导巨噬细胞泡沫化中的作用及其作用机制,从而进一步研究巨噬细胞泡沫化对矽肺纤维化的影响。方法第一阶段实验,使用100 ng/ml的豆蔻酸佛波醇乙酸酯（PMA）将处于对数期生长的人周围血单核细胞（THP-1）,诱导分化为THP-1源性的巨噬细胞,培养48 h后,分为4个实验组:空白对照组细胞不做任何处理,给与ox-LDL对照组的培养基含终质量浓度50μg/ml的ox-LDL的培养基,给与50μg/ml SiO₂组的培养基含终质量浓度50μg/ml的SiO₂和50μg/ml ox-LDL的培养基,给与100μg/ml SiO₂组的培养基含终质量浓度为100μg/ml的SiO₂和50μg/ml的ox-LDL,培养48 h后,通过MIC测试条法检测细胞活力,通过油红O染色法和胆固醇试剂盒法观察巨噬细胞脂质蓄积的情况,酶联免疫吸附实验法检测巨噬细胞上清液中CypA表达情况,以蛋白质印迹法检测细胞中CypA表达的情况。第二阶段实验,用同样的方法建立泡沫细胞模型,采用慢病毒转染使CypA过表达,设立组别为空白对照组（Control,不做任何处理）,过表达组（OE,过表达病毒）,阴性对照组（NC,100μg/ml SiO₂+50μg/mlox-LDL+对照病毒）,过表达实验组（OE+T,100μg/ml SiO₂+50μg/mlox-LDL+过表达病毒）;采用基因沉默的方法使CypA低表达,设立组别为对照组（Control,不做任何处理）,SiCypA组（SiCypA）,阴性对照组（NC,NC+100μg/ml SiO₂+50μg/mlox-LDL）,SiCypA实验组（SiCypA+T,SiCypA+100μg/ml SiO₂+50μg/mlox-LDL）,培养48h。采用第一阶段的方法检测CypA的表达变化以及泡沫化情况。在第三阶段,基于亲环蛋白A的过表达,CD36途径被阻断,细胞随机分为以下四个实验组:对照组（DMSO）,SSO抑制剂组（5μM SSO）,模型组（DMSO+SiO₂+ox-LDL）以及SSO实验组（SSO+SiO₂+ox-LDL）,每个组培养48h。使用与第一阶段相同的方法观察细胞泡沫化情况。将第一、二、三阶段的各组别细胞的上清培养人肺成纤维细胞（HFL-1）,蛋白质印迹法检测细胞中胶原蛋白1（COLⅠ）和a平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达水平。结果1 MTS结果显示:与对照组比较,SiO₂质量浓度为100μg/ml时细胞活力最强。2油红O染色结果显示,与空白对照组相比,100μg/ml SiO₂组细胞泡沫样变化显着。3与空白对照组比较,ox-LDL对照组、50μg/ml SiO₂组、100μg/ml SiO₂组细胞内TC、FC表达水平均升高（P<0.01）,且CE比重增加（P<0.01）。4CypA在细胞内表达水平均降低（P<0.01）,上清液中CypA表达水平均升高（P<0.01）。5 CypA过表达模型构建成功后,与NC相比,细胞上清液中CypA表达明显增多（P<0.01）,油红O染色结果显示,OE+T组细胞橘红色色脂滴明显增多;与NC组相比,OE+T组细胞内TC、FC表达水平均升高（P<0.01）,且CE比重增加（P<0.05）。6巨噬细胞中CypA基因沉默后,与NC组相比,上清液中CypA表达降低（P<0.01）;SiCypA+T组橘红色脂滴明显减少,与NC组相比,SiCypA+T组细胞内TC、FC表达水平均降低（P<0.01）,且CE比重减少（P<0.05）。7亲环蛋白A过表达模型中CD36蛋白的表达也增加（P<0.01）,SSO抑制剂阻断CD36通路后,结果显示,与DMSO+T组相比,SSO+T组细胞内橘红色脂滴明显减少,TC、FC表达水平均降低（P<0.01）,且CE比重减少（P<0.05）。8用各组上清液刺激人肺成纤维细胞（HFL-1）,结果显示,与空白对照组相比,100μg/ml SiO₂组,COLⅠ和α-SMA蛋白水平均升高（P<0.05）;与NC组相比,OE+T组COLⅠ和α-SMA蛋白水平均升高（P<0.05）;与NC组相比,SiCypA+T组COLⅠ和α-SMA蛋白水平均降低（P<0.05）。结论1 CypA在巨噬细胞泡沫化过程中的表达发生变化。2 CypA在巨噬细胞泡沫化过程中发挥一定作用。3 CypA发挥作用过程可能与介导CD36表达有关。4巨噬细胞泡沫化可介导矽肺纤维化过程。图32幅;表12个;参139篇。