硒是维持人体健康的必需微量元素之一。硒多糖是一种较理想的补硒剂,它既可以避免无机硒的毒性,又可同时发挥硒和多糖的生理作用。陕西安康被誉为“中国硒谷”,盛产富硒菊花。测定富硒菊花中硒的含量,分析富硒菊花硒多糖的生物活性,对于富硒菊花资源的科学开发和综合利用具有积极意义。本研究以富硒菊花、菊叶为原料,建立了定量测定菊花、菊叶中硒含量的氢化物原子荧光光谱法(HG-AFS),分析了富硒菊花和菊叶中硒多糖的理化性质,研究了硒多糖的结构特性,并通过体外实验和动物实验初步探究了硒多糖的降血糖活性,主要内容和研究结果如下:(1)建立了定量分析菊花中硒元素的氢化物原子荧光光谱法,并运用该方法测定了陕西省市售菊花样品的硒含量和安康富硒菊不同部位的硒含量。采用单因素实验和正交试验优化得到的最佳测定条件为:负高压为320V,灯电流为85mA,硼氢化钠浓度为1.0%。系统适应性实验结果显示,该方法的标准曲线方程为y=116.86x+88.69(r2=0.9998),线性范围为 10.00-100.00μg/L,检出限(LOD)、定量限(LOQ)分别为2.60、7.88μg/L,精密度为1.27%,平均回收率为98.38%。该方法精确、灵敏、简便、安全,分析成本较低。测定发现,陕西省各地市菊花样品中硒的含量存在较大差异,其中安康、西安、渭南的菊花样品达到了富硒食品标准,安康富硒菊茎和叶中硒含量也相对较高,值得进一步研究。(2)本文采用乙醇梯度沉淀法对富硒菊花硒多糖CMPt和菊叶硒多糖CLPt进行分级(CMP30、CMP50、CMP70、CLP30、CLP50、CLP70)。采用 HG-AFS 测定多糖的硒含量,采用体外抗氧化实验(DPPH·、·OH、ABTS·+自由基清除实验和总还原力实验)和体外降血糖实验(抑制α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶活力实验)测定各组分多糖的生物活性,确定富硒菊花硒多糖生物活性最佳组分为CMP50,菊叶硒多糖生物活性最佳的组分为CLP50,并且CLP50活性优于CMP50。采用色谱方法等对两个组分硒多糖进行了结构鉴定。结果发现,CMP50的硒含量为0.068μg/g,粘均分子量为6.13*104Da,其对DPPH·、·OH、ABTS’+自由基的EC50分别为0.47、4.35、3.78mg/mL,对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶的IC50分别为17.9、4.49mg/mL,该多糖在663cm-1处有Se-O-C的特征吸收峰,确定该多糖为硒多糖,该多糖在水溶液中存在不对称结构,可能具有三股螺旋结构,其微观形貌分为两种,一种为无孔状态,一种为多孔状态,该多糖能够在0-200℃的范围内保持结构稳定。这些结构暗示其具有抗炎、抗癌、降血糖等生物活性。CLP50的硒含量为0.060μg/g,粘均分子量为3.05*104Da,其对DPPH·、·OH、ABTS+自由基的EC50分别为0.1、1.84、0.89mg/mL,对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶的IC50分别为3.27、2.71mg/mL,该多糖在631cm-1处有Se=O和Se=H的特征吸收峰,确定该多糖为硒多糖,该多糖在水溶液中以片状结构存在,不具有螺旋结构,其微观形貌分为四种,其中两种与富硒菊花硒多糖一致为表面光滑的无孔状态和表面多孔的不规则状态,另外两种为不规则的网状和规则的棱状。该多糖能够在0-200℃的范围内保持结构稳定。这些结构暗示其具有抗肿瘤、抗氧化、降血糖等生物活性。(3)以注射链脲佐菌素(STZ)导致的I型糖尿病小鼠模型验证CLP50的降血糖活性。结果显示,600mg/kg的CLP50能够有效的缓解小鼠的“三多一少”现象,降低糖尿病小鼠的血糖值且不引起低血糖并发症,也有一定缓解小鼠脏器损伤的作用。通过小鼠葡萄糖耐受实验发现,CLP50具有一定改善糖尿病小鼠血糖调节的能力,其生物利用程度较高。对小鼠血清和肝脏中的生化指标进行测定后发现,CLP50能够显著提高小鼠的血清胰岛素含量,降低糖化血清蛋白含量,增加小鼠肝脏中的抗氧化酶活力。CLP50具有辅助降血糖作用,并且不会导致低血糖并发症,安全性相对较高,具有潜在的开发利用价值。