第一部分内吗啡肽的抗伤害性感受效应　　 目的：观察内吗啡肽-1和内吗啡肽-2对各种伤害性刺激的拮抗作用。　　 方法：分别采用醋酸扭体法、热板法、甩尾法测定大鼠侧脑室给予1、2、4、8μg药物时,对照组、内吗啡肽-1组、内吗啡肽-2组及吗啡组的抗伤害性感受效应。　　 结果：1.内吗啡肽-1和内吗啡肽-2在大鼠热板和热甩尾实验中的ED50及95％可信限为2.1μg(1.8～3.0μg)和3.6gg(2.7～4.8μg),在醋酸扭体实验中的ID50及95％可信限为3.8μg(2.1～4.5μg)和5.1μg(4.0～6.7μg)。2.热甩尾实验中,2μg和4μg内吗啡肽-1在5、10、20min时痛阈变化明显高于吗啡,而8μg内吗啡肽-1仅在5、10min时痛阈的变化高于吗啡;内吗啡肽-2与吗啡无明显差别。　　 结论：内吗啡肽对热刺激和化学刺激有剂量依赖性的短程、强效的抗伤害性感受作用。　　 第二部分内吗啡肽对大鼠巨噬细胞功能的影响　　 目的：观察内吗啡肽对大鼠腹腔巨噬细胞吞噬、杀菌和分泌功能的影响,探讨μ阿片受体内源性激动剂对免疫细胞功能的调节作用。　　 方法：将纯化后的大鼠腹腔巨噬细胞随机分为空白对照组,内吗啡肽-1组,内吗啡肽-2组和羟甲芬太尼组(n=10),观察不同药物浓度(10-6、10-7、10-8、10-9、10-10 mol/L)和浓度为10-6mol/L在不同作用时间(0、6、12、24h)时巨噬细胞功能变化。TNF-α、IL-1β采用ELISA法测定;巨噬细胞吞噬、杀菌能力用吞噬变化百分率、杀菌百分率及NBT还原反应测定。　　 结果：1.三组巨噬细胞的吞噬变化率、杀菌百分率、NBT还原率均显著低于对照组。内吗啡肽-1组吞噬变化率、NBT还原率与羟甲芬太尼组相比,下降的程度更加显著(p＜0.01)。2.内吗啡肽-1在10-9～10-6mol/L时对巨噬细胞培养上清中TNF-α、IL-1β浓度有明显抑制作用,内吗啡肽-2和羟甲芬太尼则在10-8～10-6mol/L有抑制作用。3.以10-6 mol/L浓度培养,内吗啡肽-1在12h就对TNF-α、IL-1β生成有显著抑制,而内吗啡肽-2和羟甲芬太尼在24h后才明显出现这种作用。　　 结论：内吗啡肽抑制巨噬细胞吞噬、杀菌等宿主防御免疫反应和产生TNF-α、IL-1β等介质的分泌功能,发挥着重要的免疫调节作用。内吗啡肽-1与内吗啡肽-2及羟甲芬太尼对巨噬细胞功能的影响存在差异。　　 第三部分内吗啡肽1的依赖潜力及对μ阿片受体的调节　　 目的：观察内吗啡肽-1(EM-1)的耐受和依赖形成过程及其对脑组织μ阿片受体的调节,探讨EM-1的依赖性及其机制。　　 方法：60只SD大鼠随机分为生理盐水组、EM-1急性处理组和EM-1慢性处理组。急性处理组大鼠侧脑室注射10μg/kg EM-1一次,慢性处理组大鼠于每天8:00、15:00侧脑室注射EM-1共9d,剂量依次为10、15、20、25、30、35、40、45、50μg/kg,并选第1、3、6、9d进行观察。EM-1的耐受性采用Dixon改良法求出,依赖性采用自然戒断和纳洛酮催促戒断法测定。M阿片受体采用3H-DAMGO Scatchard分析法和RT-PCR半定量表达法测定。　　 结果：1.EM-1慢性处理第3d就出现3.1倍和1.9倍的耐受,第9d高达28.4倍和8.5倍。慢性处理第9d跳跃反应,体质量丢失和戒断评分均显著高于对照组。2.EM-1慢性处理第9d时,大鼠纹状体、中脑、额叶皮质μ阿片受体的结合容量、mRNA表达均明显低于对照组和急性处理组而亲和力没有发生明显变化。　　 结论：EM-1具有耐受性和依赖性,EM-1慢性处理后μ阿片受体的结合容量和mRNA表达出现下调并与依赖发生有关。