基于液芯波导技术的化学发光免疫分析系统测定甲胎蛋白

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液芯波导管(LCW)具有限定光信号沿特定路线通过内全反射进行传播的功能,将其应用到化学发光检测中可以在液芯波导管的末端检测光信号。由于检测窗口小,将来可以将液芯波导技术用于阵列检测。本文利用Teflon AF涂层的石英毛细管和顺序注射系统,建立了结构简单、试剂消耗少、分析速度快且操作方便的液芯波导化学发光检测系统,并用于检测肿瘤标志物甲胎蛋白。第一章,首先综述了免疫分析的基本知识、免疫分析方法以及微流控免疫分析的特点,介绍了化学发光免疫分析在肿瘤标志物检测中的应用;然后介绍了液芯波导技术及液芯波导技术在化学发光检测中的应用。最后,提出本文的工作目的及设计思想。第二章,使用Teflon AF涂层的石英毛细管,建立了基于液芯波导技术的化学发光免疫检测系统,并用于肿瘤标志物甲胎蛋白的定量分析。采用共价键结合的方法将甲胎蛋白抗体固定在Teflon AF涂层的石英毛细管内壁,利用顺序注射系统控制试样和试剂的体积及流速。优化了孵育时间、发光底物的体积、发光底物的流速、辣根过氧化物酶标记的甲胎蛋白抗体的体积分数等实验参数。在最优的实验条件下,测定系统的线性范围为5.0-800ng/mL,检出限为0.52ng/mL (S/N=3),对500ng/mL的甲胎蛋白进行3次测定的相对标准偏差为7.1%,用该方法测定肝癌疑似患者血清中的甲胎蛋白,回收率为95.4-104.3%。第三章,对基于液芯波导技术的化学疫发光免分析测定甲胎蛋白系统进行了总结。
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