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本文对AT1受体自身抗体在高血压合并ACS患者斑块不稳定中的相关分析及机制进行了探讨。本研究分为三个部分：
第一部分：AT1受体自身抗体与高血压合并急性冠脉综合征患者发病风险的分析。
目的：在妊高征和恶性高血压患者血清中检测到抗血管紧张素Ⅱ1型受体自身抗体(AT1-AA)的存在,同时有研究表明该自身抗体有类似血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的激动样作用并参与血管炎症、细胞增殖等的从而介导心血管疾病的发生发展。在此我们将进一步探讨抗AT1受体自身抗体(AT1-Aas)与高血压合并急性冠脉综合征(ACS)患者的发病风险。
方法：收集原发性高血压合并ACS患者、单纯ACS患者、单纯原发性高血压患者共80例及正常对照16例,采用酶联免疫吸附法(ELISA)对标本血清进行抗AT1受体抗体检测,分析并比较各组间AT1-Aas及超敏C反应蛋白(hsCRP)、血脂血糖等水平,进一步通过多元线性回归分析各组间AT1-Aas与血脂、血糖及炎症因子hsCRP表达的相关性。
结果：单纯ACS组患者血清AT1-Aas水平较对照组升高(分别为0.26±0.087,0.21±0.063),但未达统计学意义(P=0.105);而单纯高血压及高血压合并ACS组其血清AT1-Aas水平则显著高于对照组(P=0.001和0.000),同时高血压合并ACS组也明显高于单纯高血压组(分别为0.40±0.153,0.33±0.126,P=0.044)。另外,在除对照组外的其它各组中AT1-Aas水平与hsCRP的表达呈正相关。
结论：AT1-Aas与高血压合并ACS患者的发病风险呈正相关,尤其与炎症因子hsCRP水平呈一定相关性。
第二部分：AT1受体自身抗体与动物血清炎症因子TNF-α、IL-6表达的关联性研究。
目的：抗AT1型受体自身抗体(AT1-AA)可导致血管内膜功能失调及其拟AngⅡ的激动性生物学效应,本研究进一步探讨AT1-Aas注射动脉粥样硬化动物模型后该抗体水平与动物炎症因子TNF-α、IL-6的相关性。
方法：建立球囊拉伤所致高脂血症兔动脉粥样硬化模型,免疫亲和层析纯化AT1-Aas,30只新西兰白兔随机分成6组即:对照组(PBS注射)、低浓度.AT1-Aas组、高浓度AT1-Aas组、losartan(简称L)+AT1-Aas组、辛伐他汀+AT1-Aas组及7aa+AT1-Aas。同时采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测注射前后不同时间段AT1-Aas、TNF-α、IL-6的表达,并分析比较给药前后不同时间段各组间AT1-Aas、血脂、TNF-α及IL-6等的水平,同时通过多元线性回归分析AT1-Aas与TNF-α及IL-6的关联性。
结果：除PBS注射组外其余各组中第8周(W8)、第10周(W10)血清AT1-Aas水平明显高于W0,具有统计差异,P＜0.05;且各组血脂水平于第4周(W4)较实验开始(W0)已明显升高。给予低浓度和高浓度AT1-Aas刺激后其血清TNF-α水平W8(0.173±0.043,0.435±0.082)、W10(0.233±0.042,0.839±0.109)较W0(0.042±0.027,0.078±0.022)时显著升高,所有P＜0.05,且效应呈浓度依耐性。而IL-6则在高浓度AT1-Aas刺激后W10(0.418±0.077)较刺激前即W0(0.039±0.010)明显升高,差异具有显著性(P＜0.05)。其TNF-α及IL-6的表达与AT1-Aas呈正相关。其余L+AT1-Aas组、辛伐他汀+AT1-Aas组及7aa+AT1-Aas组给药前后其炎症因子表达无明显差异。
结论：AT1-Aas与炎症因子TNF-α、IL-6的表达明显相关,且呈浓度依赖性,同时其效应可被Losartan、辛伐他汀及7aa抑制。
第三部分：AT1受体自身抗体对动物动脉粥样硬化斑块稳定性的影响。
目的：AT1受体自身抗体(AT1-Aas)具有拟AngⅡ激动样生物学活性,拟观察AT1-Aas注射动脉粥样硬化动物模型后,其粥样硬化斑块稳局部炎症及与斑块稳定性之间的关系。
方法：建立球囊拉伤所致高脂血症兔动脉粥样硬化模型,免疫亲和层析纯化AT1-Aas,同时随机将动物分成6组,即模型对照组、低浓度AT1-Aas注射组、高浓度AT1-Aas注射组、losartan灌胃+高浓度AT1-Aas注射组、辛伐他汀灌胃+高浓度AT1-Aas注射组、7aa+高浓度A注射组。经6周高脂饮食喂养后将纯化的AT1-Aas按不同组分多次注射动物4周后,行腹主动脉标本进行HE染色比较各组斑块所占管腔面积,同时行免疫组化及western blotting检测MCP-1及MMP-2的表达。
结果：低浓度和高浓度AT1-Aas组斑块占管腔面积百分值分别为46.99％±13.06％和66.11％±19.67％,明显高于对照组(27.71％±7.46％)、losartan+AT1-Aas组(34.27％±12.38％)、辛伐他汀+AT1-Aas(24.03％±8.56％)及7aa+AT1-Aas(28.54％±12.50％),P值均＜0.05。免疫组化检测低浓度和高浓度AT1-Aas组MCP-1平均OD值分别为0.112±0.023和0.150±0.019,后者表达明显高于前者,P=0.002;且两组MCP-1的表达明显高于其余各组,差异达统计学意义,所有P＜0.01(各组n=5)。经低浓度(0.419±0.032)和高浓度(0.535±0.038)AT1-Aas刺激后其MMP-2的表达均明显高于其它组,P＜0.05。
结论：AT1-Aas可明显促进高脂喂养兔受损动脉内膜处斑块形成,且加重斑块局部炎症反应的发生。