【摘 要】
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组织特异型启动子指导基因在植物的特定组织或器官中表达,可以避免植物营养的不必要浪费,在基因工程中是重要的顺式作用元件。本研究选用普通野生稻(Oryza rufipogon Griff.)
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组织特异型启动子指导基因在植物的特定组织或器官中表达,可以避免植物营养的不必要浪费,在基因工程中是重要的顺式作用元件。本研究选用普通野生稻(Oryza rufipogon Griff.)为材料,分析实验室前期构建的普通野生稻cDNA文库,筛选到了9个根特异表达候选基因,分别克隆这些基因的启动子,与含有β-glucuronidas(gus)报告基因的植物表达载体连接,并转化拟南芥。转基因拟南芥GUS组织化学染色与定量结果表明,OrRSGp调控gus基因仅在根部特异表达。转化水稻表达分析结果与拟南芥中一致。OrRSGp为根特异表达启动子,长度为896bp,含有CAAT-box、TATA-box等主要功能元件,还有参与茉莉酸甲酯反应的响应元件,以及抗旱、抗逆等响应元件。该根特异启动子为植物基因工程提供了新的调控元件。干旱是影响作物生产最重要的环境压力之一。植物的根系发育直接受到环境因素影响,拥有发达的根系可以吸收深层土壤中的水分。普通野生稻具有丰富的遗传多样性,而且根系发达,具有宿根性繁殖的特点。实验以前期构建的普通野生稻cDNA文库为基础,通过生物信息学分析,筛选出17个候选基因,分别构建表达载体,转化拟南芥。通过对转基因拟南芥的干旱处理与表型分析,最终确定OrAELP1为普通野生稻抗旱基因。经过对过表达OrAELP1的拟南芥进行抗旱相关生理指标以及抗旱相关通路基因的检测,初步证明其增强了拟南芥的抗旱能力。
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