目的:全球每年有约1810万癌症新发病例和约960万癌症死亡病例。肝癌发病率为4.7%,占各类癌症发病率的第六位;死亡率为8.2%,占各类癌症死亡率的第四位。在中国肝癌发病率占所有肿瘤中第四位、死亡率占第二位。在治疗方面,手术是肝癌治疗的首选,但肝癌手术患者存活率依然低。肝癌对目前其他治疗手段敏感性差,这成为肝癌致死率居高不下的重要原因。尽管,因此,分子层面的靶向治疗越来越引起人们的重视,但目前发现的几种对于肝癌的分子靶向治疗效果还不够理想。Septins是一种包含13个成员且进化上高度保守能与GTP结合的细胞骨架蛋白,存在于不同的生物中,包括酵母菌、沙门氏菌、秀丽隐杆线虫、果蝇和人类。在哺乳动物中,越来越多的研究发现septins参与各种细胞过程,包括胞吐作用、细胞凋亡、胞质分裂、肿瘤发生和神经变性。研究显示,septins在肿瘤中的蛋白表达发生明显变化。作为第四种细胞骨架蛋白,septins包括SEPT2、SEPT3、SEPT6和SEPT7四个亚家族。在分类上SEPT7亚家族似乎是独特的,仅包含一个成员SEPT7。在结构上septin7能与其他种类的septins结合,形成不同的多聚体复合物,并且是他们的核心成分,如果缺乏septin7将导致这些多聚体复合物中蛋白的丢失,甚至复合物的降解。在功能上septin7参与细胞增殖,胞质分裂,神经发育和生殖系统形成等。对于septin7参与人类疾病,特别是在癌症中的作用方面,目前的研究并不多见,其分子机制尚不清楚。SEPT7在肝癌发生发展中的作用未见报道。因此,本课题主要目的是研究SEPT7对肝癌的影响及其发挥作用的潜在分子机制。方法:1.通过蛋白质印迹法和免疫组织化学染色实验,检测SEPT7在肝癌组织中的表达情况。2.通过慢病毒包装系统,建立肝癌Bel-7402和Huh7细胞SEPT7过表达和敲低的稳转细胞系。3.通过MTT和克隆形成实验,检测肝癌Bel-7402和Huh7 SEPT7稳转细胞系的增殖能力。4.通过流式细胞仪,检测肝癌Bel-7402和Huh7 SEPT7稳转细胞系的凋亡情况;通过蛋白质印迹法检测相关凋亡蛋白的变化。5.通过流式细胞仪检测SEPT7是通过影响细胞周期哪个时相来调控细胞增殖能力;通过蛋白质印迹法检测相关周期蛋白的变化。6.通过Transwell实验,划痕实验和3D肿瘤球侵袭实验,检测肝癌Bel-7402和Huh7 SEPT7稳转细胞系的迁移、侵袭能力;通过蛋白质印迹法检测相关迁移、侵袭蛋白的变化。7.蛋白质印迹法检测SEPT7通过何种信号通路影响肝癌细胞生物学功能。结果:1.肝癌组织中SEPT7表达较癌旁组织明显升高。2.成功建立肝癌Bel-7402和Huh7细胞SEPT7过表达和敲低的稳转细胞系。3.SEPT7被敲低后明显抑制Bel-7402和Huh7细胞的增殖能力,过表达SEPT7后,明显促进Bel-7402和Huh7细胞的增殖能力。4.SEPT7被敲低后明显诱导Bel-7402和Huh7细胞凋亡。5.SEPT7通过影响肝癌细胞G2/M期来调控细胞周期。6.敲低SEPT7明显抑制肝癌细胞的迁移和侵袭,过表达后明显促进肝癌细胞的迁移和侵袭能力。7.敲低SEPT7后,p-AMPK明显升高,p-AKT和p-ERK下降;过表达SEPT7后p-AMPK明显下降,p-AKT和p-ERK升高。结论:1.SEPT7在肝癌组织中高表达,与肝癌Grade正相关。2.SEPT7蛋白可促进肝癌细胞的增殖,抑制肝癌细胞的凋亡,并促进肝癌细胞的迁移和侵袭能力。3.SEPT7蛋白通过调控AMPK,AKT,ERK信号途径促进肝癌的进展。