胰岛素结构与功能的研究——胰岛素B22,B24或B25位突变对其结构功能的影响

来源 :中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fattingmore
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本文主要分为两个部分,第一部分为胰岛素B22,B24或B25突变对其结构功能的影响,第二部分为三七根茎中多肽类物质的初步研究。 胰岛素是由胰岛β细胞分泌的一种蛋白质类激素,对糖尿病的治疗具有重要的意义。胰岛素在胰岛细胞中与锌结合形成六聚体,进入血液以后,六体解离成单体,发挥其生物学功能。自身聚合性质延缓了胰岛素启效的时间,不利于糖尿病病人血糖的严格控制。胰岛素B链C端对于胰岛素的结构功能及自身聚合都具有重要意义。 本研究的工作集中在胰岛素B22,B24和B25位的突变研究。利用重组表达的方法得到B22Glu-DesB30-insulin,它保留了大部分的体内生物活力,且在高浓度时仍为单体,具有潜在应用价值。通过酶促半合成的方法用非天然氨基酸L-4,4-联苯丙氨酸(Bip)分别代替B24Phe和B25Phe得到了B24Bip和B25Bip取代的胰岛素及C端截断类似物。通过对它们的活性、溶液构象和聚合性质进行的研究,发现与天然胰岛素相比,B24Bip-insulin几乎完全丧失生物活性,而B25Bip-insulin则具有139%受体活力及50%的体内活力。B24Bip-amide DHI与其它DHI类似物相似,具有低受体活力,高体内活力的特点;圆二色谱和荧光光谱分析表明低生物活力的胰岛素类似物结构趋于紧密。同时Bip取代使原为单体的B25Phe-amide DPI和B24Phe-amide DHI趋于聚合,B24Bip-insulin则趋于单体。 中药三七具有活血止血的功能,是云南白药的主要成分,并对治疗心血管疾病有显著的疗效。目前三七中小分子多肽类物质研究尚属空白。通过沉淀和凝胶层析,得到了分子量为6~7kDa的小分子多肽混合物,N端氨基酸序列分析显示主要有两条序列,还有待进一步分离纯化和研究。
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