基于核酸适配体的可视检测

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核酸适配体是一类具有特殊碱基序列的寡核苷酸分子,不仅是遗传信息的载体,还可以与不同类型的靶标,如小分子、毒素等进行特异性杂交,同时核酸适配体具有的易于合成、易于修饰、尺寸小、稳定性好以及良好的亲和力和特异性等优点,使得通过核酸适配体制备各种检测探针成为研究的热点。本论文基于核酸适配体建立可视检测体系,主要开展以下两个方面的工作:1.构建基于核酸适配体的镉离子可视检测体系。以镉离子适体修饰金纳米粒子制备镉离子检测探针(Au NPs-DNA),氧化4-硝基苯酚构建可视传感体系,当体系中有镉离子存在时,核酸适配体与镉离子结合,适体卷曲并将Au NPsDNA表面封闭,导致Au NPs-DNA的催化作用被抑制,4-硝基苯酚无法被氧化褪色,体系长时间呈现黄色;当体系中没有镉离子存在时,核酸适配体在Au NPs-DNA表面舒展,4-硝基苯酚被氧化,体系由黄色褪为无色,镉离子越多,褪色时间越长,据此建立相应的比色卡,实现了镉离子的高选择性可视检测。实验结果表明,本方法在0-30μmol/L呈线性关系,检出限5μmol/L2.构建基于核酸适配体的黄曲霉毒素B1的可视检测体系。以黄曲霉毒素B1适体修饰金纳米粒子制备黄曲霉毒素B1检测探针(Au NPs-DNA),氧化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)构建可视传感体系,当体系中有黄曲霉毒素B1存在时,核酸适配体与黄曲霉毒素B1结合,适体卷曲并将Au NPs-DNA表面封闭,导致Au NPs-DNA的类酶活性被抑制,TMB无法被氧化显色,体系呈现无色;当体系中没有黄曲霉毒素B1存在时,核酸适配体在Au NPs-DNA表面舒展,TMB被氧化,体系由无色变为蓝色,黄曲霉毒素B1越多,体系中蓝色越浅,实现了高选择性的检测黄曲霉毒素B1。实验结果表明,本方法在0-800 nmol/L呈线性关系,检出限为160 nmol/L。
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