目前,在人参不定根培养过程中主要以茉莉酸甲酯(非生物诱导子)作为诱导子对不定根进行处理,但因茉莉酸甲酯价格昂贵,给规模化生产造成极大负担。因此,选用一种价格低廉、易获取且高效的诱导子代替茉莉甲酯具有重要意义。另外,诱导子诱导人参不定根皂苷积累时,对信号分子转导的探明对皂苷调控有积极意义,但目前尚缺乏这方面的研究报道。因此,本研究以反应器培养30 d的人参不定根为试验材料,以黑斑病菌为生物诱导子通过研究黑斑病菌不同使用方法(多糖提取液、菌丝体和浆液)的不同处理浓度及不同处理时间对人参不定根中皂苷积累的影响,发现黑斑病菌最佳使用方式是匀浆液,当用200 mg·L-1匀浆液处理8 d时,人参不定根中皂苷含量最大,是未处理的3.78倍。信号转导方面,用黑斑病菌处理人参不定根时,一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性、皂苷含量均有显著增加。在此基础上,研究了 NO供体(SNP)、NO抑制剂 carboxy-2-phenyl-4,4,5,5-tetramethy-limidazoline(c-PTIO)、NOS 抑制剂 N-硝基-L精氨酸甲酯(L-NAME)和S,S’-1,3-phenylenebis(1,2-ethanediy1)-bis-isothiourea(PBITU)对黑斑病菌诱导的人参不定根中NO水平、NOS活性和皂苷含量的影响,结果表明,黑斑病菌诱导子依赖NOS介导的NO信号途径诱发人参不定根中皂苷的积累积累。用黑斑病菌处理人参不定根时,也能显著促进过氧化氢(H2O2)的含量,但当H2O2抑制剂过氧化氢酶(CAT)与黑斑病菌共同处理时,人参不定根中H2O2及皂苷含量均显著下降,说明H2O2参与了黑斑病菌诱导子诱导人参不定根中皂苷的积累,且H2O2达到峰值的时间迟于NO迸发的时间,可以推测H2O2位于NO的下游。此外,在本试验中,还发现黑斑病菌能提高人参不定根中多胺的含量。将黑斑病菌添加到人参不定根中促进了多胺量的增加,且单独添加外源腐胺(Put)的不定根中皂苷和多胺的含量也均有显著提高,但皂苷含量仍低于诱导子单独处理下的含量。将多胺抑制剂D-精氨酸(D-Arg)和黑斑病菌共同处理人参不定根,结果发现,不定根中多胺量显著下降,且皂苷含量与对照相比无显著差异,说明多胺参与了黑斑病菌诱导子诱导的人参不定根中皂苷的积累过程。