背景和目的抗磷脂综合征（APS）是由抗磷脂（aPL）抗体引起的一组临床症候群。目前APS的诊断采用的仍为2006年修订的分类标准,其中临床标准只纳入了血栓事件和病理性妊娠两项。血小板减少是除上述两项表现外最为常见且重要的APS临床表现之一,近期也有越来越多的学者支持将血小板减少加入APS分类标准中。然而APS相关血小板减少仍有许多问题尚无定论,如APS伴血小板减少患者有何临床特征,与APS临床表现及aPL抗体是否具有特异相关性,出血和血栓事件的风险如何等。关于APS相关血小板减少的具体发病机制研究也十分有限。除了已广泛研究的aPL抗体介导血小板活化引起血小板清除增加和可能存在血小板特异性抗体导致血小板破坏增多以外,是否有其他机制参与尚未有研究报道。有研究表明抗血小板抗体可抑制体外巨核细胞成熟和血小板释放,作为由免疫因素介导的血小板减少,APS患者是否同样存在巨核细胞的生成或成熟障碍以及血小板释放减少。本研究旨在回答上述问题,并探究aPL抗体在APS血小板减少中的作用机制,为改进临床诊断和处理提供依据。材料和方法第一部分我们回顾性分析了 2009年-2019年于北京协和医院住院治疗的原发性APS（PAPS）患者,通过比较血小板减少组和血小板正常组PAPS患者的临床资料和实验室检查资料,分析血小板减少患者的临床特征和未来症状再发风险,并应用单因素和多因素Logistic回归分析筛选血小板减少的危险因素。第二部分我们首先建立了脐血来源CD34+细胞定向分化巨核细胞的体外培养体系并根据巨核细胞的分化成熟情况确定最佳细胞收集时间。之后在培养体系中分别加入PAPS伴血小板减少患者和血小板正常PAPS患者血清,并以原发免疫性血小板减少症（PITP）和正常人血清作为对照,评估PAPS患者血清对体外巨核细胞的增殖、成熟以及血小板生成的影响。第三部分我们进一步分析了 PAPS患者血清介导的体外培养巨核细胞的凋亡比例、Caspase3活化程度,并通过RNA-Seq高通量测序比较各组间基因表达差异情况。采用ELISA法进一步明确PAPS患者血清的IgG型aPL抗体滴度和TPO水平。结果第一部分中,最终纳入127例PAPS患者,其中合并血小板减少的有36例（28.3%）,中位年龄38岁,女性占63.9%。血小板减少组的平均血小板计数为58.9±27 × 109/L,其血栓及病理性妊娠发生率较血小板正常组无显著差异;自身免疫性溶血性贫血（19.4%）、网状青斑（16.7%）、慢性肾脏病变（25%）、aPL三阳性比例（61.1%）和补体水平降低发生率增加;且改良APS总体评分（aGAPSS）的分值显著升高。多因素Logistic回归分析中,低补体血症（OR值5.032,95%CI 3.118-22.095）是血小板减少的高危因素.第二部分中,脐血来源CD34+细胞在rhTPO 50ng/mL终浓度刺激下,培养14天时巨核细胞增殖、分化成熟状态最佳,选择第14天收集细胞进行正式实验。正式实验共纳入10例伴血小板减少PAPS患者（A1组）、10例血小板正常PAPS患者（A2组）、4例PITP患者（B组）和8例健康对照（C组）。与C组相比,A1、A2组加入培养体系后,巨核细胞均有增多趋势,但成熟比例显著降低、4N及以上多倍体巨核细胞形成障碍、前血小板形成巨核细胞比例和血小板生成数目显著减少。与B组相比,A1、A2组总巨核细胞生成数目、成熟巨核细胞比例无显著差异,A1组多倍体细胞形成比例更低,但前血小板形成巨核细胞比例、血小板生成数目更高,A2组则无差异。A组内比较,aPL抗体三阳性比例较高的A2组（90%）,其前血小板形成巨核细胞比例及血小板生成数目明显低于A1组（aPL抗体三阳性占60%）。第三部分中,A1组和A2组IgG型aCL和抗β 2GPI抗体水平显著高于C组（aCL抗体分别为 27.9±46.5,64.3±82.0,2.6±0.6GPL/mL;抗β2GPI 抗体分别为 18.0±39.6,34.2±43.4,1.6±0.5U/mL）,但抗体滴度与巨核细胞成熟抑制程度间无线性相关。与C组相比,A1组巨核细胞凋亡比例显著降低,A2组亦有降低趋势;与B组相比则无显著差异。RNA-Seq测序显示A1组巨核细胞凋亡过程终末阶段相关底物基因表达显著降低。临床血小板减少的PAPS患者的TPO水平为132.4 ±75.8pg/mL,虽高于正常人水平（43.0±19.5pg/mL）,但仍存在TPO水平相对不足。结论PAPS伴血小板减少患者的aGAPSS评分显著升高,TPO水平相对不足。低补体血症可能是血小板减少的危险因素。我们首次发现,不论临床有无合并血小板减少,PAPS患者血清均可导致体外巨核细胞成熟障碍、血小板生成减少。该抑制作用与IgG型aCL和抗β 2GPI抗体水平间无浓度依赖性,作用机制可能与抑制凋亡相关。