丹参酮ⅡA在HIBD诱导的新生鼠心肌细胞凋亡中的作用研究

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目的:探讨丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,TSⅡA)对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(Hypoxic ischemic brain damage,HIBD)后其心肌细胞凋亡及凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9、Cytc表达的影响。方法:选择7日龄SD大鼠40只,随机数字法分组,分为假手术组、HIBD组、TSⅡA低剂量组、TSⅡA高剂量组。假手术组仅做切开右侧颈部皮肤,分离右侧颈总动脉,不做结扎,并缝合伤口;TSⅡA低剂量组则在HIBD术后每日腹腔注射一次丹参酮ⅡA磺酸钠35mg/kg,48h后取大鼠心脏组织;TSⅡA高剂量组在HIBD术后每日腹腔注射一次丹参酮ⅡA磺酸钠70mg/kg,48h后取大鼠心脏组织;HIBD组在HIBD术后每日腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液,直至取标本日。取大鼠血液检测各组心肌酶CK、CKMB、LDH、AST指标;HE染色观察各组心脏组织形态变化,免疫组化染色法对各心脏组织Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9、Cytc蛋白的阳性表达强度进行检测,同时基于TUNEL染色方法对各组新生鼠检测心肌细胞凋亡率。结果:1、血生化指标变化:HIBD组CK、CKMB、LDH、AST均高于假手术组、TSⅡA低剂量组和TSⅡA高剂量组(P<0.05);TSⅡA高剂量组、TSⅡA低剂量组的血CK、CKMB、LDH、AST均高于假手术组(P<0.05);TSⅡA高剂量组的CK、CKMB、LDH、AST低于TSⅡA低剂量组(P<0.05)。2、心脏组织HE染色变化:假手术组心肌细胞排列规整,未见炎症细胞浸润及水肿;HIBD组可观察到心肌细胞排列不规整,同时伴有炎症细胞浸润和组织水肿改变;TSⅡA低剂量组、TSⅡA高剂量组的炎症细胞浸润及细胞水肿较HIBD组均有不同程度的改善,且TSⅡA高剂量组改善较TSⅡA低剂量组更好。3、心脏组织TUNEL染色评估凋亡率的变化:HIBD组凋亡率高于假手术组(P<0.05);TSⅡA高剂量组和TSⅡA低剂量组凋亡率高于假手术组,但均低于HIBD组(P<0.05),且TSⅡA高剂量组心脏组织凋亡率低于TSⅡA低剂量组(P<0.05)。4、免疫组化Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9、及Cytc蛋白表达量变化:假手术组心脏组织Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9及Cytc的蛋白表达量均较少;HIBD组心脏组织Bax、Caspase-3、Caspase-9、及Cytc的表达量均高于假手术组、TSⅡA高剂量组和TSⅡA低剂量组(P<0.05);TSⅡA低剂量组Bax、Caspase-3、Caspase-9、Cytc的蛋白表达量高于TSⅡA高剂量组的表达量(P<0.05)。HIBD组Bcl-2表达量高于假手术组,但TSⅡA高剂量组和TSⅡA低剂量组Bcl-2表达量均高于HIBD组(P<0.05),且TSⅡA高剂量组Bcl-2表达量高于TSⅡA低剂量组(P<0.05)。结论:在HIBD诱导的心脏损伤中,TSⅡA对心脏组织有保护作用。
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