目的：探讨头穴丛刺结合丰富环境对缺氧缺血脑损伤大鼠海马CA1区细胞凋亡及BDNF/TrkB通路相关蛋白的影响。方法：选用清洁级7日龄Sprague-Dawley幼鼠,参照Rice-Vannucci法建立缺氧缺血性脑损伤(HIBD)幼鼠模型。按照随机数字表法随机分成5个实验组：假手术组、缺氧缺血组、头穴丛刺组、丰富环境组及头穴丛刺结合丰富环境组。假手术组、缺氧缺血组大鼠给予同等条件抓取,不进行任何治疗；头穴丛刺组大鼠给予头穴丛刺治疗；丰富环境组给予丰富环境治疗；头穴丛刺结合丰富环境组给予头穴丛刺结合丰富环境治疗。缺氧缺血后14d、28d,采用Morris水迷宫实验评估各组大鼠空间学习记忆能力；HE法观察各组大鼠海马CA1区病理形态改变；TUNEL法观测各组大鼠海马CA1区细胞凋亡水平；Western Blot法检测各组大鼠海马CA1区Caspase-3、 Bcl-2、BDNF、TrkB、p-ERK及p-Akt蛋白表达水平。结果：1.Morris水迷宫判断各组大鼠空间学习记忆能力(1)定位航行实验造模后14d、28d,缺氧缺血组大鼠逃避潜伏期较假手术组明显延长,有显著差异(P<0.05)；经头穴丛刺、丰富环境、头穴丛刺结合丰富环境治疗后,大鼠逃避潜伏期较缺氧缺血组明显缩短,差异显著(P<0.05)；其中以头穴丛刺结合丰富环境组大鼠逃避潜伏期缩短最为明显,与头穴丛刺组、丰富环境组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)空间探索实验造模后14d、28d,缺氧缺血组大鼠穿台次数较假手术组明显减少,有显著差异(P<0.05)；经头穴丛刺、丰富环境、头穴丛刺结合丰富治疗后,大鼠穿台次数较缺氧缺血组明显增加,差异显著(P<0.05)；其中以头穴丛刺结合丰富环境组大鼠穿台次数增加最为明显,较头穴丛刺组、丰富环境组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。2.HE染色观察海马CA1区病理形态改变假手术组大鼠海马CA1区神经元细胞轮廓清楚,排列紧密,布局有序,形态完整,胞核居中,核仁明显,胞浆丰富,无神经元丢失；而缺氧缺血组神经元细胞轮廓模糊或消失,胞体缩小,排列紊乱,细胞间隙变大,可见神经元细胞变性、坏死、崩解,核固缩、碎裂,可见大量神经元丢失。各治疗组各时间点病理损伤有所减轻,以头穴丛刺结合丰富环境组最为明显。3.TUNEL法检测各组大鼠海马CA1区细胞凋亡情况造模后14d、28d,缺氧缺血组大鼠海马CA1区TUNEL阳性细胞数较假手术组明显增多,有显著差异(P<0.05)；经头穴丛刺、丰富环境、头穴丛刺结合丰富环境治疗后,大鼠海马CA1区TUNEL阳性细胞数较缺氧缺血组明显减少,差异显著(P<0.05)；其中以头穴丛刺结合丰富环境大鼠海马CA1区TUNEL阳性细胞数减少最为明显,与头穴丛刺组、丰富环境组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。4.Western Blot法检测海马CA1区Caspase-3、Bcl-2、BDNF、TrkB、 p-ERK及p-Akt蛋白的表达水平(1)Caspase-3:造模后14d、28d,缺氧缺血组大鼠海马CA1区Caspase-3表达较假手术组明显升高,有显著差异(P<0.05)；经头穴丛刺、丰富环境、头穴丛刺结合丰富环境治疗后,大鼠海马CA1区Caspase-3表达较缺氧缺血组降低,差异显著(P<0.05)；其中以头穴丛刺结合丰富环境组Caspase-3表达降低最为明显,与头穴丛刺组、丰富环境组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Bcl-2：造模后14d、28d,缺氧缺血组大鼠海马CA1区Bcl-2表达较假手术组明显升高,有显著差异(P<0.05)；经头穴丛刺、丰富环境、头穴丛刺结合丰富环境治疗后,大鼠海马CA1区Bcl-2表达进一步升高,差异显著(P<0.05)；其中以头穴丛刺结合丰富环境组Bcl-2表达增加最为明显,与头穴丛刺组、丰富环境组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)BDNF:造模后14d、28d,缺氧缺血组大鼠海马CA1区BDNF表达较假手术组明显升高,有显著差异(P<0.05)；经头穴丛刺、丰富环境、头穴丛刺结合丰富环境治疗后,大鼠海马CA1区BDNF表达较缺氧缺血组明显上调,差异显著(P<0.05)；其中以头穴丛刺结合丰富环境组BDNF表达升高最为明显,与头穴丛刺组、丰富环境组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)TrkB:造模后14d、28d,缺氧缺血组大鼠海马CA1区TrkB表达较假手术组明显升高,有显著差异(P<0.05)；经头穴丛刺、丰富环境、头穴丛刺结合丰富环境治疗后,大鼠海马CA1区TrkB表达较缺氧缺血组明显上调,差异显著(P<0.05)；其中以头穴丛刺结合丰富环境组TrkB表达升高最为明显,与头穴丛刺组、丰富环境组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(5)p-ERK:造模后14d、28d,缺氧缺血组大鼠海马CA1区p-ERK表达较假手术组明显升高,有显著差异(P<0.05)；经头穴丛刺、丰富环境、头穴丛刺结合丰富环境治疗后,大鼠海马CA1区p-ERK表达较缺氧缺血组明显上调,差异显著(P<0.05)；其中以头穴丛刺结合丰富环境组p-ERK表达升高最为明显,与头穴丛刺组、丰富环境组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(6)p-Akt:造模后14d、28d,缺氧缺血组大鼠海马CA1区p-Akt表达较假手术组明显升高,有显著差异(P<0.05)；经头穴丛刺、丰富环境、头穴丛刺结合丰富环境治疗后,大鼠海马CA1区p-Akt表达较缺氧缺血组明显上调,差异显著(P<0.05)；其中以头穴丛刺结合丰富环境组p-Akt表达升高最为明显,与头穴丛刺组、丰富环境组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：1.头穴丛刺结合丰富环境可改善缺氧缺血性脑损伤大鼠学习记忆能力,降低海马CA1区的病理损伤,发挥神经保护作用。2.头穴丛刺结合丰富环境可降低缺氧缺血性脑损伤大鼠海马CA1区细胞凋亡程度,抑制海马CA1区Caspase-3蛋白表达,促进Bcl-2蛋白表达。3.头穴丛刺结合丰富环境可上调缺氧缺血性脑损伤大鼠海马CA1区BDNF、TrkB、p-ERK、p-Akt蛋白表达,提示其神经保护作用可能与调控BDNF/TrkB信号通路有关。