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科学技术的迅速发展推动了医药水平的进步,同时对中药的使用提出了更高的要求,通常一种中药含有多种化学成分,而有效药用成分可能仅仅是其中的一种或两种,因此采用合理的方法对中药化学成分分离纯化极其重要。本文对中药半枝莲、射干、大豆异黄酮化学成分的分离纯化方法进行了优化,从而建立了高效、简单的纯化方法。一、半枝莲黄酮类化合物分离纯化的研究本文建立了大量制备纯度较高的半枝莲黄酮类化合物单体的方法:运用聚酰胺柱将成分复杂的粗提取物进行预分离,用PHPLC对分段后的各样品纯化制备得到单体。对提取方法、提取溶剂、提取溶剂的浓度、提取次数等提取工艺条件进行了优化,建立了最佳提取方法。提取后将浸膏装入聚酰胺柱进行初步分离,然后将初步分离的组分用PHPLC进一步纯化。所用PHPLC色谱柱为C18柱(400mm×25.4mm ID20um),流动相为甲醇-水。从半枝莲全草中分离纯化出6个黄酮类化合物:芹菜素-5-O-β-D-葡萄糖苷、柚皮素、野黄芩素、木犀草素、4′-羟基汉黄芩素、芹菜素,其纯度分别为96.8%、95.6%、96.9%、99.4%、97.2%、98.4%,各化合物结构利用核磁鉴定。二、射干化学成分分离纯化研究建立了运用硅胶柱色谱法和PHPLC对射干有效化学成分分离纯化的方法。先用硅胶柱对射干化学成分进行预分离,将初步纯化后的组分用PHPLC进一步纯化得到纯度较高的单体。所用PHPLC色谱柱为C18柱(400mm×25.4mm ID20um),检测波长为296nm,流动相为甲醇-水。得到了次野鸢尾黄素、野鸢尾黄素、野鸢尾苷元、茶叶花宁、3′,5′-二甲氧基尼鸢尾黄素-4′-O-β-葡萄糖苷、白藜芦醇、鸢尾苷、野鸢尾苷8种化合物,各化合物的纯度分别为95.9%、97.2%、92.1%、93.8%、98.9%、95.0%、93.4%、99.0%,各化合物结构利用核磁鉴定。三、大豆异黄酮纯化研究建立了运用SOURCE15RPC作为制备型高效液相色谱的固定相、运用甲醇-0.1%磷酸作为流动相分离纯化大豆中大豆异黄酮的方法。所用检测波长为254nm,流速为15ml/min,进样量为5ml,流动相(甲醇-0.1%磷酸)按照:0-10min,45%甲醇;10-25min,45%-95%甲醇的方式进行梯度洗脱。经纯化从大豆提取物中得到大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素这五种大豆异黄酮,其纯度分别是98.6%、97.8%、99.3%、99.5%、99.1%,各化合物结构利用核磁鉴定。