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背景：miRNA是一类长约18-25nt的不编码蛋白质小RNA分子,通过结合靶基因抑制靶基因的翻译或者降解靶基因来发挥作用。miRNA对肿瘤的发生、发展、预后均有影响,是目前研究的热点,有可能成为一种对肿瘤的诊断和治疗的靶点。骨肉瘤最常见的恶性骨原发性肿瘤,好发于青年人,临床上具有生长快、病程短、死亡率高的特点。现骨肉瘤的诊断主要依靠临床症状,影像学检查加上病理检查作为确诊依据的模式。现临床上缺少早期、无创、敏感的生物性标志物。本实验旨在通过研究骨肉瘤血清中miRNA的表达谱,希望可以发现骨肉瘤特异性表达谱,辅助骨肉瘤的早期诊断、治疗。目的：探索骨肉瘤病人血清中相关miRNA的表达水平,建立骨肉瘤特异性的miRNA表达谱,为进一步研究骨肉瘤与miRNA的诊断与治疗打下基础。材料与方法：应用生物芯片技术初筛出骨肉瘤病人血清中相关的miRNA表达谱,并应用实时荧光定量PCR (stem-loop RT-qPCR, TaqMan探针法)验证相关骨肉瘤血清中表达谱。收集骨肉瘤病人未化疗血清10例,和正常健康人血清10例,采用生物芯片技术,初步检测血清中miRNA差异性的表达谱,将芯片数据采用SAM系统统计。并采用U6snRNA为内参,qRT-PCR测量检测了芯片结果中相对正常人群表达明显上调和下调的miR-199a-5p、miR-199a-3p、 miR-133a和miR-515-5p。结果：1、在骨肉瘤病人血清与正常健康人群血清中通过生物芯片法与RT-qPCR均可测出miRNA。2、通过生物芯片技术测出一系列的骨肉瘤病人与健康人群血清中miRNA差异性表达谱；3、采用qRT-PCR技术测定miR-199a-5p、miR-199a-3p、miR-133a和miR-515-5p与生物芯片测得结果一致。结论：1、人类血清中存在miRNA并且可通过生物芯片法及实时荧光PCR技术进行检测；2、通过生物芯片方法可以测定出miRNA在骨肉瘤中与正常健康人群差异性表达谱,并通过qRT-PCR验证的miR-199a-5p、miR-199a-3p、miR-133a和miR-515-5p可作为骨肉瘤候选的血清学生物标志物；3、骨肉瘤可能存在特异性的血清miRNA表达谱。