人参皂苷-Re对帕金森病模型小鼠脑内多巴胺能神经元保护作用机制的研究

被引量 : 5次 | 上传用户:okyshishuo
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种多发于中老年人的慢性神经系统退行性疾病,其特征性病理改变为黑质致密部多巴胺能神经元(dopamincrgic neuron)变性、坏死,继而引起纹状体多巴胺(Dopamine,DA)含量降低。由于PD病因及发病机制目前还不完全清楚,一般认为,氧化应激、细胞凋亡和线粒体功能障碍等多种因素增加了PD的易感性。因此,对神经元的保护和抗细胞凋亡等方面的治疗已成为现在PD治疗的主要思路。其中中药治疗在提高PD治疗效果、减少副作用和控制PD的一些非运动障碍症状等方面取得了一定的疗效。 人参皂苷-Re(ginsenoside-Re,以下简称Re),为名贵中药人参的有效成分之一,其生物活性广泛。Re与人参皂苷-Rbl、-Rb3、-Rg1等均有不同程度抗氧化和清除自由基的作用,在前期的研究工作中我们也发现Re可通过调节脑内单胺类递质的合成与代谢而达到抗氧化应激的作用。故推测Re可能具有治疗PD的作用。 本研究以C57BL/6小鼠为研究对象,用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyddine,MPTP)制备PD小鼠模型,分别用行为学、高效液相色谱.电化学检测法(High performance liquid chromatography-electrochemical detection,HPLC-ECD)、逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)、免疫组织化学染色法、原位杂交法(In situ hybridization histochemistry,ISHH)、DNA断裂点标记法(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end-labeling,TUNEL)、蛋白免疫印迹法(Western blotting)以及透射电镜(Transmission electron microscope,TEM)等技术和方法观察Re预处理对MPTP诱致PD小鼠的黑质致密部(substantia nigra pars compacta,沈阳药科大学博士学位论文摘要sNc) DA能神经元是否有保护作用,并进一步探讨其可能的脑内细胞分子生物学机制。主要结果如下:1.人参皂昔一Re对帕金森病小鼠多巴胺神经元的保护作用 通过爬杆、悬吊和游泳三项行为学实验结果显示,模型组小鼠均出现不同程度的行为障碍,得分较生理盐水对照组明显降低;而Re预防给药组小鼠得分则未见明显降低,以Re预防给药高、中剂量尤为显著。提示Re对模型小鼠的运动协调能力有明显的改善作用。 模型组小鼠纹状体DA含量下降84%,高香草酸(homovanillie aeid,HVA)含量下降65%,HV阳DA比值增高。而Re预防给药组小鼠纹状体内DA和HVA含里明显恢复,HV阳DA比值降低;运用免疫组织化学染色法可观察到模型组黑质致密部酪氨酸轻化酶(tyrosine hydroxylase,TH)免疫反应阳性神经元数目与生理盐水对照组相比明显减少(降至正常的40%左右),Re预防给药组TH免疫反应阳性神经元明显高于模型组,故可以判定此MP仰致小鼠PD模型造模成功,并揭示Re具有保护黑质多巴胺神经元的作用。 胶质原纤维酸性蛋白(glia fabrill卿aeidie nrote恤,GEAP)免疫组化结果显示:与生理盐水对照组相比,模型组小鼠中脑黑质部可见GFAP免疫反应阳性星形胶质细胞增生(P<0 .01);而高、中剂量Re预防给药组与模型组比较未见明显的GEAP免疫阳性星形胶质细胞的增生(P<0 .01)。结果表明DA神经元损伤程度明显减轻与Re具有防止黑质致密部瘫痕化胶质细胞增生有关。 本研究证实,与生理盐水对照组相比,模型组PD小鼠的纹状体(CPu)和黑质网状带(SNr)丫一氨基丁酸(Y一姗访。b试州c acid,GABA)免疫反应阳性神经元数目明显减少(P<0.01),而Re预防给药组小鼠CPu和sNr区未见GABA免疫反应神经元数目减少。结果提示,Re通过增加PD小鼠黑质网状带GABA能神经元的表达,以保证两个通路的兴奋一抑制平衡。我们推测Re可能是通过促进CPu和SNr内的GABA能神经元的表达,从而抑制SNr的过度兴奋,调节基底节神经回路的兴奋抑制平衡而发挥其抗PD作用的。2.人参皂昔一Re对帕金森病小鼠中脑黑质多巴胺神经元凋亡的保护作用 透射电镜检查是目前鉴定细胞凋亡最具特征性的手段,TUNEL检测法是细沈阳药科大学博士学位论文摘要胞凋亡最敏感的方法之一。本实验结果发现,凋亡的黑质多巴胺神经元细胞缩小,细胞核体积缩小,细胞膜完整,染色质固缩聚集于核膜形成一个或数个沿核膜分布的块状小体或新月型小体。经一定剂量的Re预处理后,存活神经元数目增多,多巴胺能神经元脱失现象减少,凋亡细胞比例也随之下降。以上的研究结果提示,Re对MP仰诱致黑质神经元凋亡有阻断作用,并且此作用与Re的剂量呈一定的量效关系。 P53免疫组化结果发现:与生理盐水对照组相比,模型组小鼠黑质P53蛋白表达显著增多(P<0.05),而Re预防给药组小鼠黑质P53蛋白表达与模型组相比显著减少(尸切,05)。结果提示,Re的抗黑质DA能神经元凋亡的作用机制可能与减少P53蛋白表达有关。 本研究观察到模型组MP仰可诱导黑质致密带Bax蛋白和bax mRNA表达水平增加,而Bcl一2蛋白和bd一2 mRNA表达水平降低,与生理盐水对照组相比差别显著(尸<0.01);同时Re预防给药组与模型组比较,小鼠黑质致密带Bcl一2蛋白和bd一2 mRNA表达水平均
其他文献
在实验室条件下,利用四臂嗅觉仪测定了源于3种寄主以及2种寄主栖境健康和蛀道组织的不同质量浓度提取液对花绒寄甲的嗅觉反应。分别用二氯甲烷和乙醚对3种寄主挥发性化合物抽
在野外调查取样和室内实验分析的基础上,对人工林与天然林的土壤养分进行比较分析,结果表明人工林土壤表层的有机质、全氮、全磷、全钾含量都明显低于天然林,反映了人工林对
相对于道路路段而言,交叉口由于车流的转向而引起的各种车流之间的冲突、交叉、交织、分流、合流等行为使交叉口的交通特性比较复杂,交叉口往往成为城市交通畅行与否的关键点。
《文学的存在方式研究》向文学提出这样一个问题:文学是如何存在的?它在将文学视为一种客观的、独立的存在者的基础上追问文学这一存在者的整体存在,文学的这种整体存在就是通
武术是一项融合中国古代优秀传统文化和民族智慧的体育项目,是中华民族传统体育文化殿堂上的一颗璀璨明珠.在高校体育选项课的制度下,街舞、跆拳道、健身操、体育舞蹈等这些
介绍差示扫描量热仪在轮胎硫化程度和胶料中不溶性硫黄转化率分析中的应用。试验结果表明:随着硫化的进行,硫化胶的放热峰面积和硫化热焓减小,可通过硫化胶与未硫化胶的硫化峰面
<正> 本方法是一个比较实用的工程近似方法。其基本思想是考虑了管内附面层和核心流之间存在着强干扰,必须将附面层方程和无粘核心流方程联立求解。否则,两层之间的流动可能
随着社会的发展,人们的安全意识得到了不断的加强。近年来,煤炭、矿山等企业由于煤气泄漏、瓦斯爆炸等造成的伤亡事故时有发生,严重影响和制约了煤炭企业的安全生产。
摘 要 能源是推动社会进步和人类赖以生存的物质基础。近 100 年来,全球能源消耗平均每年以 3﹪的速度递增,大量能源的消耗,同时带来了十分严重的环境问题,如气候变暖、生态破坏
医院Ⅱ类环境包括普通手术室、产房、婴儿室、供应室洁净区、烧伤病房、重症监护室病房等,均为医院感染管理的重要场所.为了解洛阳市医院Ⅱ类环境空气消毒质量与消毒方法,于2