【摘 要】
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聚多巴胺(PDA),作为一种合成黑色素,具有和天然黑色素(Melanin)相同的理化性质,具有抗肿瘤和抗菌的活性。本试验主要对PDA表面修饰和载体负载方面进行研究,以提高PDA的使用效率。本试验对PDA化学合成方法进行了优化,在避光条件下以一定原料比例合成出了一种粒径均一,形态均匀的PDA,同时利用π-π作用与共价键作用,将天然药物槲皮素(Q)修饰在PDA表面,得到槲皮素-聚多巴胺(PDA-Q),
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聚多巴胺(PDA),作为一种合成黑色素,具有和天然黑色素(Melanin)相同的理化性质,具有抗肿瘤和抗菌的活性。本试验主要对PDA表面修饰和载体负载方面进行研究,以提高PDA的使用效率。本试验对PDA化学合成方法进行了优化,在避光条件下以一定原料比例合成出了一种粒径均一,形态均匀的PDA,同时利用π-π作用与共价键作用,将天然药物槲皮素(Q)修饰在PDA表面,得到槲皮素-聚多巴胺(PDA-Q),并通过红外吸收光谱,紫外吸收光谱,扫描电镜SEM分析,透射电镜TEM分析和Zeta电位粒径分析对PDA和PDA-Q进行了表征。Q具有天然的抗肿瘤和抗菌活性,在酸性或中性条件下,PDA外壳脱落,可以有效地将槲皮素释放出来,以达到抗菌效果。通过MIC试验,CFU试验,LIVE/DEAD试验和超薄切片试验来验证了PDA-Q的抗菌效果。本试验研究结果如下:PDA和PDA-Q呈直径为100 nm左右的黑色球状,粒径均一,形态均匀,PDA-Q在酸性条件下的Q的释放率高于中性条件下。抑菌试验筛选出耐药型大肠杆菌目标细菌,MIC值为10.6±0.34μg/m L。CFU及LIVE/DEAD试验表明了相同药物浓度的PDA-Q的抑菌活性更强,且抑菌效果随药物浓度增加而增加。超薄切片试验进一步分析了潜在的抑菌机制:PDA-Q可以进入细胞内,从而破坏了细菌完整性引发细菌死亡。同样由于PDA-Q水溶性较低,在肿瘤治疗方面不具有靶向性,生物利用率受到极大限制。本试验受天然细胞地启发,针对纳米载体体内运输中遇到的非靶向性运输的难题,研究如何利用生物体内肿瘤细胞同源靶向的特性,提取小肠癌(HIC)细胞的细胞膜,包裹了PDA-Q,得到了细胞膜包裹的PDA-Q(C@PDA-Q),并通过MTT试验,LIVE/DEAD试验和细胞流式检测技术来验证了C@PDA-Q的抗肿瘤效果。本试验的研究结果如下:C@PDA-Q呈直径为127 nm左右的球状,外部有膜状结构。在MTT试验中,筛选出HIC细胞为目标对象,C@PDA-Q处理的HIC细胞的IC50值为12.3±0.7μg/m L,在LIVE/DEAD试验结果中,相同浓度下,C@PDA-Q的抗肿瘤效果最好。在细胞流式检测技术分析结果中,随着C@PDA-Q的浓度升高,抗肿瘤效果逐渐增强,呈浓度依赖性。
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