论文部分内容阅读
目的:
为探讨核仁素(nucleolin,NU)表达变化对化疗药物阿霉素所致的人乳腺癌细胞MCF-7增殖抑制与凋亡的影响。探讨核仁素在肿瘤细胞增殖以及凋亡过程中的作用及相关机制。以及联合化疗时对细胞的作用改变,为肿瘤治疗提供新的思路。
方法:
首先用Western Blotting检测正常培养的MCF-7细胞中核仁素的表达,对比脂质体转染核仁素寡核苷酸后核仁素的表达。用Western Blotting比较加化疗药物(阿霉素,ADR)干预前后核仁素的表达变化。设定不同的对照组,采用反义寡核苷酸技术抑制MCF-7细胞中核仁素的表达、选择合适的化疗药物浓度和作用时间处理细胞后,用MTT法检测细胞的增殖状况,用流式细胞术检测细胞凋亡。
结果:
1.将设计的核仁素反义寡核苷酸导入MCF-7细胞,24小时后收集细胞总蛋白,采用免疫印记分析发现,反义寡核苷酸能显著抑制核仁素的表达,而正义寡核苷酸则对核仁素的表达无明显影响。
2.取接近IC50的阿霉素作用于MCF-7细胞24小时,收集细胞总蛋白,采用免疫印记分析发现,此浓度的化疗药使细胞内核仁素的表达显著下降。
3.核仁素反义寡核苷酸增强了阿霉素对MCF-7细胞增殖抑制和促凋亡作用。与核仁素正义寡核苷酸组、单纯阿霉素处理组、以及核仁素正义寡核苷酸联合阿霉素同时处理组对照,均有统计学意义。
结论:
1.核仁素反义寡核苷酸、接近IC50的阿霉素使MCF-7细胞核仁素的表达下调。
2.核仁素表达下调能显著促进阿霉素所致的MCF-7细胞增殖抑制和凋亡。