目的：　　 观察同病异证H22肝癌小鼠甲状腺AC-cAMP信号通路基因差异表达的特征，揭示肝癌同病异证发生的物质基础。　　 方法：　　 1.体内实验一，采用小鼠标准化、计量化诊法方法，筛选获得同病异证H22荷瘤小鼠，即邪毒壅盛证和气虚证荷瘤小鼠，与无证候的正常小鼠对照，综合采用Affeymetrix基因芯片等技术，检测各组小鼠甲状腺基因差异表达，重点分析与甲状腺激素合成和分泌主要相关的AC-cAMP信号通路。　　 2.体内实验二，再次筛选获得同病异证H22荷瘤小鼠，RTqPCR检测甲状腺AC-cAMP信号通路差异表达基因的转录水平，同步采用ELISA方法测定血清甲状腺激素T3、T4水平。　　 3.体内实验三，设邪毒濒危组（邪危组）、邪毒壅盛证组（邪毒组）、邪毒居中组（邪中组）、邪毒微弱（邪微组）等4个不同程度的肿瘤邪毒组，以及邪毒居中兼气虚组。RTqPCR检测甲状腺AC-cAMP信号通路差异表达基因转录水平，及ELISA技术检测血清TSH、T3、T4、FT3、FT4等激素水平。　　 4.体外实验，观察TSH不同量效、时效条件下，对FTC-133细胞系AC-cAMP信号通路相关基因转录水平的影响。　　 结果：　　 1.体内实验一，从150只H22肝癌荷瘤小鼠中，筛选出早期邪毒壅盛证、早期气虚证小鼠各8只，合并RNA样本，每组得到16654个芯片数据，数据分析表明，同病异证小鼠甲状腺AC-cAMP通路基因差异表达的总体特征为：(1)一些基因相对关键，Tg和转录因子Pax8等在肿瘤发生早期业已下调，TSHr在邪毒证下调而气虚证略有上调。(2)多数基因表现为气虚证表达量略大于邪毒证，包括甲状腺主要标志性基因Nis和Tpo、腺苷酸环化酶AC、转录因子Ttf1和Ttf2，PKA催化亚基Prkaca等；(3)其他基因，激动型G蛋白Gs有轻微波动；抑制型G蛋白Gi、环腺苷酸磷酸二酯酶PDE、甲状腺激素释放溶酶体相关蛋白酶基因，在气虚证与邪毒证互有高低。　　 2.体内实验二，从200只荷瘤小鼠中，筛选得到邪毒壅盛证、气虚证各10只，该批实验，两证候荷瘤小鼠证候互相兼夹，结果：(1)甲状腺机能抑制，血清甲状腺激素T3、T4含量下降，且邪毒壅盛证下降尤为严重。(2)AC-cAMP通路Tg，Pax8，TSHr等甲状腺的一些关键基因，在肿瘤发生的早期出现下调：Nis，Tpo，AC，Ttf1，Titf2和Prkaca等基因表现为气虚证表达量略大于邪毒证。与体内实验一芯片检测结果趋势一致。　　 3.体内实验三，从220只荷瘤小鼠中，筛选得到不同程度邪盛衰度、气盛衰度荷瘤小鼠：邪危组14只、邪毒组14只、邪中组13只、气虚组10只、邪微组14只。结果：(1)血清TSH水平在邪微组、邪中组增加，邪危组、邪毒组和气虚组下降：T3近似，随着邪盛衰度程度增加而下降：T4在肿瘤发生后各组均显著下调；FT3显著升高，FT4有升高趋势。(2)AC-cAMP信号通路多数基因在邪微组表达量多上调，明显高于同期邪毒程度严重者；气虚证小鼠肿瘤增殖快且瘤重重，该信号通路基因表达抑制较严重。　　 4.体外实验，TSH可以刺激FTC-133细胞甲状腺激素生成和释放AC-cAMP途径等诸多相关基因的表达，以80mu/ml的浓度和作用6h最显著；且TSH可以在体外诱导FTC-133细胞TSHr的表达。　　 结论：　　 1.不同批次体内实验，H22肝癌小鼠肿瘤发展的进程不同，筛选到不同程度的邪盛衰度、气盛衰度荷瘤小鼠，以及不同邪毒与气虚兼证的荷瘤小鼠，充分展现出肝癌同病异证的复杂性及对垂体-甲状腺轴的抑制和程度；同时，这种证候自然复杂的演变和发展，提示及时辨证论治、调整最佳治疗方案的重要性。　　 2.同病异证H22肝癌小鼠甲状腺机能减退与甲状腺激素生成和释放AC-cAMP途径，TSHr、AC、Pax8、Ttf1、Titf2、Tg、Nis、Tpo等关键基因下调且具有一致性。提示邪毒壅盛通过抑制该途径关键基因的表达，削弱了甲状腺激素的合成与释放。　　 3.肿瘤邪毒程度与荷瘤小鼠垂体-甲状腺轴抑制程度相关。邪毒微弱时该轴处于积极的代偿状态，随着肿瘤邪毒程度的加重出现失代偿，呈现抑制，系因实致虚。提示在肿瘤综合治疗方案中，去邪联合扶正治法的必要性。　　 4.邪毒壅盛对甲状腺的抑制十分显著，气虚证亦有甲状腺机能减退的表现。　　 5.TSH可以刺激FTC-133细胞甲状腺激素生成和释放AC-cAMP途径等诸多相关基因的表达，以80mu/ml的浓度和作用6h最显著。可以用于探索邪毒壅盛抑制甲状腺AC-cAMP途径关键基因表达调控的机制，以及气虚证甲状腺AC-cAMP途径关键基因表达调控紊乱和减退的机制。　　 6.TSH可以在体外诱导FTC-133细胞TSHr的表达，可能通过激活该细胞系TSH-TSHr-AC信号通路，发挥其调节作用。