目的:本文以“H15”、“H29”、“XK1”、“XK10”、“SL15”5个黑木耳品种为对象,研究不同的营养和环境条件对黑木耳锁状联合菌丝比率的影响,以期获得较好的提高黑木耳锁状联合菌丝比率的方法,进而为黑木耳的栽培生产和新品种选育提供重要的理论依据。方法:(1)不同营养条件对黑木耳锁状联合菌丝生长的影响。将扩大培养后的5个黑木耳菌种分别转接在含有不同碳源、氮源、氨基酸的固体平板培养基中央(插片),分别以基础培养基(插片)为对照组,恒温培养;(2)不同环境条件对黑木耳锁状联合菌丝生长的影响。取扩大培养后的5个黑木耳菌种,转接在PDA固体平板培养基上(插片),试验组置于安装有不同LED光源的25℃恒温培养箱内进行不间断的照射处理,对照组进行黑暗处理;依次将接种3 d后的PDA固体平板培养基(插片)放在超净工作台30 W紫外灯垂直下方约30 cm处,打开培养皿盖,按设定的时间1min、2 min、3 min、4 min、5 min分别进行照射。照射后遮光,防止光复活。不进行紫外照射为对照组,均置于25℃恒温培养箱内培养。每隔3 d重复1次上述处理;将扩大培养后的5个黑木耳菌种转接到PDA固体平板培养基上(插片),分别置于20℃、25℃、30℃、35℃恒温条件下处理;(3)培养基优化实验。根据前期试验结果,选取了“H29”作为进一步研究的黑木耳品种,并且确定了对其锁状联合菌丝比率促进作用最明显的碳源、氮源、氨基酸分别为蔗糖、牛肉膏、丙氨酸。先进行单因素试验,以确定蔗糖、牛肉膏、丙氨酸对“H29”锁状联合菌丝比率促进的最佳浓度,再通过正交实验确定其最佳组合。全部实验均设置6个重复,培养12 d天,待菌丝长满插片,取出插片置于显微镜下观察。结果:(1)与葡萄糖(单糖)为碳源时相比较,“H29”以蔗糖为碳源时,其锁状联合菌丝比率增长约2/3;“H15”以可溶性淀粉为碳源时增长1倍多;“XK1”以麦芽糖为碳源时增长近2倍;5个黑木耳品种在以牛肉膏为氮源时,锁状联合菌丝比率显著(P<0.05)高于其它组,其中“H15”和“H29”最为显著(P<0.05);5个黑木耳品种在添加了丙氨酸和谷氨酸的培养基中锁状联合菌丝比率有较显著的提高:(2)红光、蓝光和紫光对“H29”和“SL15”锁状联合菌丝的形成有显著(P<0.05)的促进作用;“H15”和“H29”、“XK1”、“SL15”分别在紫外照射时间4 min、5 min、3min条件下有利于锁状联合形成;“H15”、“H29”、“XK1”、“XK10”4个黑木耳菌种,在温度为25℃下锁状联合菌丝比率均达到最高且明显(P<0.05)高于其它品种,在相同温度条件下,“H15”的锁状联合菌丝比率均低于其它4个供试菌种;(3)适当浓度的蔗糖、牛肉膏、丙氨酸均能提高“H29”锁状联合菌丝比率,其最佳组合方案是蔗糖20 g/L、牛肉膏6 g/L、丙氨酸3.5 g/L。结论:培养基中添加适宜浓度的碳源、氮源、氨基酸可以提高相应品种的黑木耳锁状联合菌丝的比率,影响程度依次为:碳源>氮源>氨基酸。光质选择红光和蓝光,影响效果好于其它几种光质;紫外照射时间应控制在3min左右,不宜长时间紫外照射,否则会大大降低菌株存活率;温度应控制在25℃左右,过低、过高均不利于菌丝生长。正交实验研究结果表明,在基本培养基中加入蔗糖20 g/L、牛肉膏6 g/L、丙氨酸3.5 g/L,将会明显提高“H29”锁状联合菌丝比率。