骨髓基质细胞诱导分化及其与心肌细胞之间相互作用的研究

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心肌细胞具有多种特异基因的表达,通过RT-PCR和免疫组化方法检测心脏特异的ANP、α-MHC、和肌钙蛋白的表达可以鉴定骨髓基质细胞向心肌分化的能力,还可应用透射电镜观察细胞超微结构的特征.用细胞共培养方法观察两种细胞之间的相互作用,观察心肌细胞与骨髓基质细胞直接接触共培养后,骨髓基质细胞表达肌钙蛋白的情况;同时也观察了将心肌细胞与骨髓基质细胞用半透膜隔开共培养时,骨髓基质细胞旁分泌作用对缺氧所致心肌细胞损伤状况的影响.实验结果显示,骨髓基质细胞5-氮胞苷体外诱导后2周,肌钙蛋白染色阳性率增加,蛤理它们还没有表达心脏特异的ANP和α-MHC基因,细胞内没有找到肌丝和肌小节结构;共培养心肌细胞没有明显改变骨髓基质细胞肌钙蛋白的表达情况,它对骨髓基质细胞没有明显的诱导分化作用;骨髓基质细胞可以部分抑制缺氧诱导心肌细胞发生凋亡,改善心肌细胞缺氧性损伤状况.以上结果提示,5-aza诱导大鼠骨髓基质细胞肌钙蛋白表达增加,提示它具有促心肌分化的作用,但是RT-PCR还没有检测到ANP和α-MHC的表达,并且骨髓基质细胞的超微结构尚未发生明显改变,所以,该药物的诱导分化的作用还需进一步的探讨;心肌细胞与骨髓基质细胞联合培养时,细胞的自分泌和旁分泌作用,以及细胞膜表面物质还不能刺激骨髓基质细胞向心肌细胞分化;但是心肌细胞损伤可能刺激骨髓基质细胞合成分泌某些可溶性因子,通过旁分泌作用于心肌细胞减少其发生凋亡;所以骨髓基质细胞移植有利于心功能的改善,是治疗心肌梗死和心衰的一种新的治疗方法.
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