【摘 要】
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斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura multinucleocapsidnucleopolyhedrovirus,SpltMNPV)p24基因编码区长735bp,编码244个氨基酸,预期分子量27.3kDa.计算机分析表明,P24
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斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura multinucleocapsidnucleopolyhedrovirus,SpltMNPV)p24基因编码区长735bp,编码244个氨基酸,预期分子量27.3kDa.计算机分析表明,P24蛋白序列包含了3个可能的N-糖基化位点与18个磷酸化或硫酰化等各种修饰位点,没有明显的功能结构域.将p24编码区克隆到表达载体pQE30中,在大肠杆菌M15中超量表达出带6×His接头的融合蛋白,大小与预期分子量一致.将此蛋白免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗血清.用此抗血清进行定位分析表明,P24只存在于包涵体病毒粒子的核衣壳中,而在芽殖型病毒粒子中则没有检测到.P24在ODV与ODV的核衣壳上的大小不一致,并且都远大于预期分子量27.3kDa.推测可能经过糖基化、磷酸化等多个位点的修饰之后组装成二聚体或者与其他结构蛋白或细胞骨架成分组合成复合体.在SpltMNPV感染的培养细胞Sl-zsu-1中,表达时相的Western印迹显示了一条杂交带,大小约为28kDa.推测P24在体外与体内的分子大小差异可能是因为环境的差异而影响了细胞内的修饰酶对蛋白的翻译后修饰加工或装配程度.转录时相表明,p24的转录是从细胞感染后12h开始;表达时相则显示P24蛋白从细胞感染后24h开始表达,感染后72h表达量显著增加,持续到感染后96h.实验结果分析显示,SpltMNPV p24基因是一个晚期基因.
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