L-门冬酰胺酶在临床治疗中,有严重的毒副作用和过敏反应。如何解决其临床治疗严重的毒副作用和过敏反应,改善酶的性能,是受到临床科研工作所关注的问题。本课题将以具有良好的生物相容性、安全无毒的天然高分子蛋白质的丝素蛋白为修饰材料,对L-门冬酰胺酶进行化学修饰。重点摸索修饰反应的最佳优化条件、初步分离纯化修饰产物以及对修饰产物进行理化性质的分析。论文的主要研究内容和结果如下:丝素蛋白修饰剂的制备。本文对从蚕茧、蚕丝中提取出的丝素蛋白进行分子量水平的均一化。利用凝胶过滤层析法（Tricorn 10×600,SephcrylTM S-300 HR）对丝素蛋白进行纯化。纯化后的丝素蛋白修饰剂达到分子量水平的均一,为后续的修饰试验提供了有利条件。修饰条件的优化。本文通过对修饰反应体系的pH值、反应温度、反应时间以及反应物的配比四个因素进行四因素四水平的正交实验。在此基础上,对交联剂戊二醛溶液浓度进行单因素实验。获得了理想的修饰反应条件:即丝素蛋白和L-门冬酰胺酶以5:1的比例,通过浓度为0.5%的戊二醛溶液的作用,在pH为7.0的PBS反应体系中,反应温度为4℃,修饰反应时间为8 h。L-门冬酰胺酶经过丝素蛋白修饰剂修饰后,修饰酶的回收率为66.58%,ε-氨基的修饰率为57.88%。修饰产物的分离纯化。为得到纯化的修饰产物,本文采用XK 16×20 Q Sepharose FF离子交换色谱和Tricorn 10×600,SephcrylTM S-300 HR凝胶过滤层析两步联用法,分别将修饰产物中的残留交联剂、未修饰完全的修饰剂、未被修饰的酶等物质除去。并利用HiTrap Desalting G-25脱盐柱进行脱盐。纯化获得残留酶活和氨基修饰率高的修饰酶样品。红外光谱分析表明,修饰酶以α螺旋结构和无规卷曲结构为主,结构性质稳定。修饰产物的理化性质的分析检测。本文研究了修饰酶的最适反应pH值、最适反应温度以及比较了L-门冬酰胺酶修饰前后的热稳定性、酸碱耐受性以及抗蛋白酶的水解能力的变化等。试验结果表明: L-门冬酰胺酶经过丝素蛋白修饰剂的修饰后,自然酶的表观米氏常数是修饰酶的6.665倍。修饰酶与反应底物的亲和力更高;修饰酶的最适反应温度是70℃,最适反应pH值是7.0;丝素蛋白修饰酶拥有比自然酶更高的热耐受性和耐碱性,以及可以有效的抗胰蛋白酶水解。