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本文以贵州玛瑙红樱桃为材料,在离体快繁及离体材料的遗传变异检测、甲基化分析等方面进行了研究,旨在建立其离体快繁、微茎尖培养体系,获得遗传稳定的玛瑙红樱桃组培苗,为该品种的工厂化育苗,离体脱毒奠定技术和理论基础。取得了以下主要成果:1.玛瑙红樱桃休眠芽离体培养技术的建立选用贵州玛瑙红樱桃休眠芽为外植体,将其鳞片剥除后滴加两滴吐温-80,用0.1%升汞进行不同时间的灭菌处理,再用无菌水冲洗数次,将已灭菌的休眠芽接种在MS+1.0mg/L GA+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂(pH=6.2)培养基上,诱导休眠芽萌发,得出最佳灭菌方式为,0.1%升汞滴加2滴吐温80灭菌10 min,其污染率为:48%,萌发率为:22%;休眠芽30-40 d后萌发,将其转接到MS+1.0 mg/L KT+1.0mg/L GA+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA培养基上进行快繁培养。最佳增殖培养基为MS+1.0 mg/L KT+1.5 mg/L GA+0.1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,增值系数达到11.5;生根培养基中有3种处理较为理想:MS+0.2 mg/L IBA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂,MS+0.3 mg/L IBA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂,MS+0.2 mg/L IAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂生根率均能达到75%,长势健康,叶片大,呈深绿色,主根粗壮且须根较多,GA3对玛瑙红樱桃的生根没有显著的影响。2.离体材料遗传变异及ISSR分子检测利用21条ISSR引物对玛瑙红樱桃第1至第8代组培苗叶片基因组DNA进行ISSR检测,21条引物在继代8代内24个株系的DNA基因组进行检测,因此在引物检测范围内,玛瑙红樱桃在第8代内利用ISSR检测,没有发生变异。3.离体材料表观遗传变异及MSAP检测利用17对选择性扩增引物,对第1代至第8代组培苗基因组DNA进行选择性扩增,得到的条带进行统计分析。从第1代至第8代,共扩增出5990条带,其中,全甲基化位点717个,半甲基化位点395个;得到各代组培苗DNA基因组半甲基化率、全甲基化率及总甲基化率,从结果可以看出,随着继代次数的增加,甲基化水平逐步增高;第1至8代组培苗,第7代组培苗总甲基化率最高为21.4%,第8代组培苗总甲基化率略微下降。