提取FMDV China99/S株组织样品总RNA，利用设计的引物，分4段进行扩增，获得了覆盖全基因组的重叠片段(A、B、C和E)，然后利用限制性内切酶分别酶切含有鼠源聚合酶I的pPIcDNA3.1(+)载体和A、B、C和E，依次定向克隆到已经构建的pPIcDNA3.1(+)载体内，得到FMDV China99/S株全长cDNA重组质粒。对该质粒进行核苷酸序列测定，结果表明，Chiha99/S株基因组全基因组序列长8116nts，其中5NCR长1064 nts，含有由引物引入的41个C的poly(C)片段；蛋白编码区的核苷酸序列为6318nts，编码一个长2106个氨基酸的聚合蛋白；3NCR长93nts，其后是至少含有38个A的poly(A)尾巴。经全序列分析表明，该基因组没有终止性突变，开放阅读框能够被正确编码，符合深入做下游工作的要求。将获得的FMDV China99/S株全长cDNA重组质粒用脂质体转染法导入BHK-21细胞，传代培养，可以观察到典型的FMDV致细胞病变效应。使用电镜、反向间接血凝鉴定试验、间接免疫荧光试验、RT-PCR和序列测定进行检测，结果表明，从该系统中拯救出了具有感染性的FMDV China99/S株重组病毒。利用蚀斑、TCID50、LD50及病毒生长曲线的测定对拯救出的FMDV China99/S进行了病毒生物学特性测定。 本实验是采取聚合酶I转录系统进行病毒体内拯救。首次证明了聚合酶I有转录8.2 kb基因(内含41个C碱基的poly(C)片段)的能力。有助于研究RNA病毒介导的复杂感染过程，为病毒分子生物学及应用研究提供了较为有价值的工具。为研究FMDV功能基因组学、致病和变异的分子机制提供一个技术平台，为研制嵌合病毒、基因缺失疫苗和标记疫苗等奠定了基础。