西红花的真伪鉴别及主要成分西红花苷Ⅰ、Ⅱ的含量测定

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目的:建立西红花药材真伪鉴别的方法以及西红花中主要成分的含量测定。为科学的评价以及有效的控制西红花药材的质量提供系统科学的方法。方法:采用传统的性状、显微、TLC的鉴别方法,结合现代GC气相色谱法区分西红花的真伪;西红花中主要成分的含量测定:采用反相高效液相色谱,以Agilent ZORBAX StableBond SB-Aq(4.6 mm x 250 mm,5μm)柱为色谱柱,流动相为0.01%甲酸水(A)-乙腈(B)进行梯度洗脱;0 min:75%A;8 min:70%A;10 min:60%A;25 min:30%A;流速:1.0 ml/min;进样量:5μl;测定波长为440 nm;柱温:30℃。结果:1、西红花和其伪品在性状上有较大差异。外观上,伪品西红花比正品好看,但用手操时会被染成红色,或手上有油样感觉。气味上,正品西红花气味特异,微有刺激性,味微苦。伪品一般无气味或有菜油样气味。2、从粉末的显微观察结果来看,西红花和其伪品的差异也比较大。西红花有其独特的花粉粒及表皮外壁凸出呈乳头状或绒毛状,这些都是伪品所没有的。3、气相色谱鉴别结果显示,西红花真品和伪品的色谱图形明显不同;真品和掺假品色谱图也有明显的区别,但特征峰的保留时间一致,只是峰高有差别。4、西红花苷HPLC含量测定的结果显示,西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ的保留时间大约分别为5.71 min和8.83 min。以峰面积对进样浓度(3.125-200μg/ml)线性回归,西红花苷Ⅰ回归方程:y=24.928x-0.2543,r=1,线性范围3.125-200μg/ml,西红花苷II回归方程:y=36.106x+8.3698,r=1,线性范围3.125-200μg/ml。西红花苷Ⅰ和西红花苷Ⅱ的回收率分别为100.5%和100.2%、RSD分别为1.43%和1.4%。从含量测定结果的试验数据可知,上海产西红花中,西红花苷Ⅰ和西红花苷Ⅱ含量较高,西藏次之,浙江和四川产较低,其中原因可能与收集的样品、产地有关,具体的原因有待进一步研究。结论:1.传统的性状、显微、TLC等鉴别方法简便、可靠,能初步的鉴别西红花及其混伪品。2.采用现代的气相色谱的方法能更进一步有效区分西红花及其混伪品,该方法简便、准确、重复性强,可为西红花真伪及品质优劣的研究提供参考依据。3.本研究同时建立了同时测定不同的国产西红花药材中西红花苷Ⅰ和西红花苷Ⅱ含量的方法,较之药典测量方法,该方法简便、准确、重现性好。
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