【摘 要】
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植物激素是植物自身产生的小分子有机物,在调控植物的生长发育过程中起着重要作用。由于植物基质复杂、植物体中植物激素的含量极低,传统的植物激素测定方法中样品消耗量大,对微量植物样品中植物激素的高灵敏分析是制约植物激素研究的技术瓶颈。因此,发展高选择性的微萃取方法、高灵敏度的检测技术用于微量植物样品中植物激素的精准测定,可为植物激素的相关调控机制的深入解析提供有力的方法学支撑。本论文选取赤霉素（gibb
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植物激素是植物自身产生的小分子有机物,在调控植物的生长发育过程中起着重要作用。由于植物基质复杂、植物体中植物激素的含量极低,传统的植物激素测定方法中样品消耗量大,对微量植物样品中植物激素的高灵敏分析是制约植物激素研究的技术瓶颈。因此,发展高选择性的微萃取方法、高灵敏度的检测技术用于微量植物样品中植物激素的精准测定,可为植物激素的相关调控机制的深入解析提供有力的方法学支撑。本论文选取赤霉素（gibberellins,GAs）、生长素（auxins）、脱落酸（abscisic acid,ABA）和茉莉素（jasmonates,JAs）共4类酸性植物激素作为研究对象,基于微萃取与质谱联用技术对痕量酸性植物激素测定进行方法学研究,取得以下研究结果:1.建立磁性固相微萃取同步衍生化与HPLC-MS/MS联用分析酸性植物激素方法基于高比表面积的二维Ti3C2材料,在其表面分别修饰Fe3O4和β-环糊精,合成具有高选择性的新型磁性固相微萃取纳米复合材料（Fe3O4@Ti3C2@β-环糊精）。Fe3O4@Ti3C2@β-环糊精能高效吸附植物激素,结合N-（3-二甲氨基丙基）-N-乙基碳二亚胺（N-（3-dimethylaminopropyl）-N′-ethylcarbodiimide,EDC）原位衍生技术,完成同步萃取、纯化和衍生化反应。优化的前处理条件为:2 mg的弗洛里硅土作为基质分散净化剂去脂,5 mg Fe3O4@Ti3C2@β-环糊精磁性材料进行吸附,40℃、90 min同步衍生。在3个加标水平下,测定结果线性良好（R~2＞0.9928）,回收率为80.4%-115.1%,基质效应为-16.63%-17.06%,方法检出限为0.89 pg/m L-13.62 pg/m L,定量限为2.99 pg/m L-260.04pg/m L。2.实现高油脂类植物种子中12种酸性植物激素的同时测定组合运用磁性固相微萃取同步衍生化与HPLC-MS/MS分析技术实现了单粒油菜种子中多种酸性植物激素的同时测定,该方法也适用于大豆、花生和芝麻等高油脂种子中酸性植物激素的测定。本文还进一步利用该方法研究了油菜籽萌发过程中不同组织（种皮、子叶、胚根、根、茎）的12种酸性植物激素的时空变化。3.基于空气辅助液液微萃取与GC-MS/MS联用测定植物中Me-JA同分异构体建立基于空气辅助液液微萃取（air-assisted liquid-liquid microextraction,AALLME）和GC-MS/MS联用分析茶叶中茉莉酸甲酯（methyl jasmonate,Me-JA）同分异构体的方法。优化的前处理条件为:100μL正辛醇为萃取剂,净化剂PSA+碳黑（1:1）有效去除植物样品中的色素,加入4 m L水和8%（w/v）Na Cl,利用空气循环萃取10次。该前处理方法富集倍数高、有机溶剂消耗量少,适用于挥发性Me-JA的萃取。对Me-JA同分异构体的气相色谱和质谱条件进行了优化,选择Rt-b DEXsm毛细管柱分离Me-JA的4种同分异构体（（+）-（3R,7S）-methyl epi-jasmonate、（+）-（3S,7S）-methyl jasmonate、（-）-（3R,7R）-methyl jasmonate和（-）-（3S,7R）-methyl epi-jasmonate）。对4种Me-JA进行分离定量,测定结果线性良好（R~2＞0.9971）,检出限和定量限分别为0.08 ng/mL-0.12ng/mL和0.28 ng/mL-0.39 ng/mL,回收率范围为80.60%-107.03%。
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