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IL-17是由IL-17+T细胞产生的细胞因子,它不仅在人类过敏反应、自身免疫疾病、肿瘤发生发展中起到一定的炎性作用,在机体抵抗细菌、真菌、病毒、寄生虫感染中也发挥着关键作用。有关IL-17在山羊机体抗感染免疫、山羊炎症反应中的作用还很不清楚,主要与缺乏山羊IL-17单克隆抗体有关。本研究用纯化的山羊r IL-17免疫BABL/c小鼠,采集小鼠血清,建立山羊IL-17抗体的间接ELISA检测方法;取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,筛选能稳定分泌特异性IL-17单克隆抗体的杂交瘤细胞。研究取得如下结果:1.IL-17包被浓度为8μg/m L,小鼠免疫血清孵育60 min,酶标二抗的稀释比例为1:5000,作用60 min的条件下,ELISA检测结果最佳;2.获得2株能稳定分泌特异性r IL-17抗体的杂交瘤细胞株,命名为B6、H8;3.B6、H8细胞株的染色体数目分别为为104条、84条;4.B6和H8分泌的单克隆抗体亚型为IgG1,抗体轻链为κ型;5.B6、H8细胞培养上清效价分别为1:28、1:29,小鼠腹水效价为1:105、1:106,纯化单克隆抗体效价均为1:105。6.B6细胞株能特异性识别r IL-17和IL-17+293T细胞培养上清,不与pET32a标签融合蛋白反应,H8细胞株只特异性识别rIL-17。Western blot结果显示,B6与重组rIL-17、IL-17+293T细胞培养上清有特异性免疫结合。本研究成功建立了山羊IL-17抗体的间接ELISA检测方法,筛选到一株能稳定分泌特异性IL-17单克隆抗体的杂交瘤细胞-B6。