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白血病,亦称作“血癌”,是一类由造血干细胞异常引起的血液系统恶性疾病。白血病在我国总发病率约占5%,其患者数量在恶性肿瘤中居第8位,在恶性肿瘤引起的死亡率中居第6位,并且呈逐年上升的趋势。20世纪70年代,哈尔滨医科大学附属医院的专家们创造性地将As2O3应用于治疗M3型急性早幼粒细胞白血病(APL),之后又发展到治疗维甲酸治疗缓解后复发的M3型患者,完全缓解率达93%以上,已被公认为M3型白血病治疗首选药物。一般认为As2O3治疗APL的主要机制是诱导白血病细胞凋亡,很少考虑其对细胞自噬的影响。本研究从As2O3对L1210细胞增殖、凋亡及自噬的影响,探讨其抗白血病的更可能的隐藏机制。本研究采用MTT法及Brdu-Elisa法测定不同浓度As2O3对L1210细胞增殖的影响,流式细胞术及AO/EB双染法检测细胞凋亡,AO染色及MDC染色检测细胞自噬,免疫印迹法检测增殖相关蛋白PCNA、凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、自噬相关蛋白LC3B的表达。另用苯诱导的小鼠再生障碍性贫血模型检测As2O3是否能刺激骨髓细胞的造血功能。细胞实验结果显示:As2O3对L1210白血病细胞呈剂量、时间依赖性生长抑制作用,24h、48h、72h半数抑制浓度(IC50)分别为11.61μmol/L±0.05、3.34μmol/L±0.03、0.13μmol/L±0.08。As2O3作用24h,细胞凋亡率随着As2O3浓度的升高而升高,5、10、20μmol/L的凋亡率分别为26.52%±0.02、30.99%±0.06、74.48%±0.05。AO/EB双染法可观察到细胞形态发生明显变化,如细胞核浓缩、凋亡细胞表面膜出泡、体积变小、细胞破裂并出现凋亡小体等形态学特征,并呈剂量依赖性。AO染色及MDC染色可观察到自噬阳性显色,且药物浓度越高,阳性率越高。Western-blot结果显示:As2O3能上调自噬相关蛋白LC3B、促凋亡蛋白BAX的表达水平,使细胞增殖相关蛋白PCNA、抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达下降,并程剂量依赖性。体内实验表明,As2O3能使再障小鼠外周血细胞数量、骨髓细胞数量、网织红细胞绝对值、血红蛋白含量增高,改善肝、肾组织的损伤情况。综上所述,As2O3通过诱导L1210细胞凋亡及自噬的产生来达到治疗淋巴细胞白血病,能刺激再障小鼠骨髓细胞的造血功能。