论文部分内容阅读
多糖是一类高分子碳水化合物,具有广泛的生物活性,近年来逐渐成为食品和医疗行业的研究热点。一些研究发现微生物胞外多糖具有良好的抗氧化活性和成膜性,因而被广泛应用于果蔬保鲜领域。强雄腐霉(Pythium arrhenomanes)是一类腐生性真菌,属腐霉科、腐霉属。目前关于腐霉代谢产物的研究大多集中在二十碳五烯酸的提取,而关于腐霉胞外多糖的研究还未见报道。本研究以强雄腐霉HA-09为研究对象,对其胞外多糖进行分离纯化和一级结构解析,探索其在天然抗氧化剂、微生物源果蔬保鲜制剂等方面的应用价值,为强雄腐霉胞外多糖的进一步开发利用提供理论和技术支持。1.强雄腐霉胞外多糖的提取纯化工艺利用醇沉法从强雄腐霉发酵液中提取得到粗多糖(Crude PEPS),产量为7.33 g/L。菌丝与多糖的干重比为3.18 g/7.33 g。强雄腐霉粗多糖中总糖含量为83.62%,蛋白质含量为6.89%。对强雄腐霉粗多糖进行分级纯化,共得到三种纯化组分:PEPS-1、PEPS-2和PEPS-3。2.强雄腐霉胞外多糖的结构鉴定一级结构解析结果表明,三种纯化组分均具有较高的纯度,不含蛋白质等杂质;纯化组分均由鼠李糖和葡萄糖构成;Crude PEPS及PEPS-1、PEPS-2和PEPS-3的平均分子量分别为:8667 Da、8129 Da、9433 Da和9360 Da;其中,PEPS-1中主要含有1→,1→6糖苷键,存在少量的1→4或1→4,6糖苷键;PEPS-2中主要含有1→4或1→4,6糖苷键,存在少量的1→3和1→,1→6糖苷键;PEPS-3中主要含有1→2,1→2,6,1→4,1→4,6糖苷键;PEPS-1、PEPS-2及PEPS-3都为α构型的吡喃糖。3.强雄腐霉胞外多糖的抗氧化测定通过测定超氧自由基清除率、羟自由基清除率、铁离子螯合能力和还原力来评价强雄腐霉粗多糖及其纯化组分的体外抗氧化能力,结果表明Crude PEPS、PEPS-1、PEPS-2及PEPS-3具有不同的抗氧化活性。在高浓度(5 mg/m L)时,超氧自由基清除能力、铁离子螯合能力及羟自由基清除能力由小到大的顺序为Crude PEPS<PEPS-1<PEPS-2<PEPS-3;还原力由小到大的顺序为PEPS-1<Crude PEPS<PEPS-2<PEPS-3。4.强雄腐霉胞外多糖在草莓采后保鲜中的作用研究选择PEPS-2作为草莓涂膜保鲜的实验材料。实验统计和测定了草莓的腐烂指数、可溶性固形物含量(SSC)、丙二醛含量(MDA)、花青素含量、抗坏血酸含量和DPPH自由基清除能力,结果表明,PEPS-2处理降低了草莓的腐烂指数和丙二醛含量,延缓了可溶性固形物含量的降低;PEPS-2处理还提高了草莓的花青素含量、抗坏血酸含量和DPPH清除能力。研究证明,使用PEPS-2对草莓进行涂膜处理是一种有效延长草莓货架期的方法,此外还能显著提高草莓采后的生理品质。