【摘 要】
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目的:探讨蚯蚓纤溶酶(earthworm fibrinolytic enzyme,EFE)对人肝癌细胞转移能力的影响。
方法:体外培养高转移人肝癌细胞株 HCCLM3,接种于裸鼠的颈背部皮下,四周后处死荷瘤鼠
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目的:探讨蚯蚓纤溶酶(earthworm fibrinolytic enzyme,EFE)对人肝癌细胞转移能力的影响。
方法:体外培养高转移人肝癌细胞株 HCCLM3,接种于裸鼠的颈背部皮下,四周后处死荷瘤鼠并剥离瘤体,将肿瘤切割为1mm×1mm×1mm大小的瘤块,接种于新一批裸鼠的肝脏,建立裸鼠人肝癌高转移原位移植模型。造模后七天将裸鼠随机分为三个组,分别给予生理盐水、低剂量EFE(800uku/kg.d)、高剂量EFE(1600uku/kg.d)连续灌胃30天。给药结束后七天处死裸鼠,打开腹腔,肉眼直接观察种植瘤的生长情况、肝内播散及腹腔种植情况,计算肝内播散率及腹腔种植率;完整剥离种植瘤并称重;通过病理切片观察肺脏中转移的肿瘤灶数目;并通过RT-PCR及Western Blot方法检测种植瘤中焦点粘附激酶(focus adhesionkinase,FAK)及β1整合素的表达。
结果:所有裸鼠均可见原位种植瘤的生长,造模成功率100%。(1)生理盐水对照组、低剂量EFE组、高剂量EFE组原位种植瘤瘤重分别为(1.57±0.05)g、(1.46±0.08)g、(1.36±0.11)g,高剂量组瘤重小于低剂量组,低剂量组瘤重小于生理盐水对照组,三组比较差别有统计学意义,P<0.05;(2)三组种植瘤肝内播散率分别为100%、71.43%、14.29%,高剂量组肝内播散率最低,生理盐水对照组肝内播散率最高,高剂量组与对照组相比差别有统计学意义,P<0.05;(3)三组腹腔种植率分别为85.71%、45.28%、14.29%,高剂量组种植率最低,而生理盐水对照组最高,高剂量组与对照组相比差别有统计学意义,P<0.05。(4)三组肺脏中肿瘤转移灶数目平均为(65.00±4.40)个、(57.00±5.16)个、(49.86±7.01)个,高剂量组肺脏转移灶数目小于低剂量组,并进一步小于生理盐水对照组,三组间比较差别有统计学意义,P<0.05。(5)低剂量组移植瘤中FAK及β1整合素在mRNA及蛋白水平的表达较生理盐水对照组明显下降,而高剂量组移植瘤中FAK及β1整合素的表达较低剂量组进一步下降,三组比较差别有统计学意义。
结论: EFE具有抗肝癌转移的作用,其机理可能为EFE能够抑制FAK及β1整合素的表达。
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