CdTe/CdS/ZnS量子点的合成、毒性探讨及在生物分析中的应用

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核壳型量子点是一种新型的无机半导体纳米晶材料。作为一种荧光标记探针,它展现出传统荧光染料所没有的许多优点。首先,量子点的激发光谱宽而连续、发射光谱窄且对称,不需要对光谱交叠问题进行严格的补偿;其次,核壳型量子点具有很好的光化学稳定性及较高的量子产率;最后,经过修饰的核壳型量子点可减小对生物体的毒性作用。近年来,核壳型量子点在分子标记及检测、多色标记、细胞成像、基于编码微球的阵列分析、环境分析以及疾病诊断等方面都得到了广泛的应用。其中,如何制备荧光效率高、生物相容性好的核壳型量子点,以及如何减小量子点在应用环境中的毒性问题仍然是量子点研究的瓶颈。本项工作在核壳型量子点的制备、毒性的初步探讨以及在细胞标记中的应用几方面做了一系列工作,得到的研究结果如下:  以半胱氨酸为稳定剂,结合水浴和水热方法一步合成CdTe/CdS/ZnS量子点,首次提出采用蠕动泵滴加反应液,使得合成量子点的重现性得到了明显改善。考察了pH、水热时间、水热温度及稳定剂的量等条件对合成量子点荧光强度的影响,探索其最佳合成条件;用紫外可见吸收光谱(UV-Vis)和荧光光谱(FL)对合成的量子点进行了光学性能表征,用透射电子显微镜(TEM)、X射线粉末衍射(XRD)、红外光谱(IR)进行了结构表征。与CdTe和CdTe/CdS量子点相比,CdTe/CdS/ZnS量子点具有更好的化学稳定性及更高的荧光量子产率。  研究中考察了CdTe、CdTe/CdS和CdTe/CdS/ZnS量子点对酵母菌及HeLa细胞生长的影响。结果表明在酵母菌生长的调整期及对数期,CdTe和CdTe/CdS量子点均抑制其生长,而CdTe/CdS/ZnS量子点对酵母菌的生长表现出最小的影响。CdTe、CdTe/CdS和CdTe/CdS/ZnS三种量子点相比,与HeLa细胞作用引起的细胞毒性依次降低,充分说明了表面包覆ZnS后可以有效地减小量子点对细胞的毒性作用。研究中观察到随着量子点浓度的增加、与细胞作用时间的延长,量子点对细胞的毒性作用加重,为量子点的安全性评价提供一定的实验依据。  将半胱氨酸修饰的CdTe/CdS/ZnS量子点,经NHS和EDC活化后与转铁蛋白共价交联,在受体介导下发生特异性结合反应,即可实现对细胞的标记。与用抗体进行的免疫标记相比,转铁蛋白价格低廉,易于获得,为量子点在生物分析中实际应用奠定了良好的基础。比较了CdTe、CdTe/CdS和CdTe/CdS/ZnS三种量子点对HeLa细胞的标记结果,表明三种量子点均成功地实现了细胞的标记。但是使用CdTe量子点进行标记,在孵育6h后细胞大部分死亡,而CdTe/CdS/ZnS量子点标记的细胞均能正常生长。
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