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目的: 1.探讨三化汤对局灶性脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion，I/R)损伤大鼠模型的神经保护作用; 2.应用水通道蛋白-4（Aquaporin4，AQP4）-shRNA干扰技术探讨AQP4可能是三化汤对局灶性脑缺血/再灌注损伤大鼠模型神经保护作用的靶点。 方法:成年雄性SD大鼠，通过侧脑室注射慢病毒载体，筛选特异性AQP4-siRNA，随机分为2组:正常组和I/R模型组，每组根据备选载体再分为5个亚组（均n=4），应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测海马组织中AQP4mRNA的表达。另SD大鼠随机分为7组:假手术（Sham）组、I/R组、三化汤(Sanhua decoction，SHD)组、空载体(Vector)组、AQP4-siRNA(RNAi)组、空载体+三化汤（SHD+Vec）组和AQP4-siRNA+三化汤(SHD+RNAi)组，每组再据6h、1d、3d、7d、14d时间点分5个亚组(均n=8)。各组均于造模前3天开始灌胃给药SHD10g·kg-1·d-1，直至取材当日;Vector组和RNAi组灌胃等量生理盐水。Vector组、RNAi组、SHD+Vec组及SHD+RNAi组在造模前48h侧脑室注射AQP4-siRNA慢病毒，其中Vector组、SHD+Vec组侧脑室注射空载慢病毒。采用线栓法阻塞大脑中动脉(Middle cerebral artery occlusion，MCAO)2h制作I/R大鼠模型，假手术组只分离血管不插入线栓;应用Longa评分1～3分筛选成功模型，并于术后各时间点进行大鼠神经功能行为学评分;干湿重法测定脑组织含水量;免疫组化（Immunological histological chemistry，IHC）及蛋白免疫印迹法（Western blot，WB）检测病灶侧脑组织AQP4的蛋白表达情况。 结果: 1.神经功能缺损评分评估:缺血/再灌注后6h，神经功能评分即升高，第3d评分最高，随后开始降低，直至术后14d仍稍高于正常水平。(1)与I/R组比较，除Sham组外，各组在再灌注后6h神经功能评分均无显著性差异(P＞0.05)，SHD+Vec组在再灌注后3d、7d神经功能评分有统计学意义（P＜0.05），SHD组和RNAi组在再灌注后1d、3d、7d均有统计学差异(P＜0.05)，SHD+RNAi组在再灌注后1d、3d、7d、14d均有统计学意义(P＜0.05);(2)与SHD组或SHD+Vec组比较，SHD+RNAi组在再灌注后1d、3d、7d均有统计学意义(P＜0.05);(3)与RNAi组比较，SHD+RNAi组在再灌注后1d、3d有统计学意义(P＜0.05)。 2.脑组织含水量测定:再灌注后6h，手术侧脑组织含水量即有升高，在第3d达到高峰，随后开始下降，直至术后14d仍稍高于正常水平。(1)与Sham组比较，I/R组和Vector组在再灌后6h、1d、3d、7d脑组织含水量均有统计学意义（P＜0.05），SHD组和SHD+Vec组在再灌后6h、1d、3d脑组织含水量均有统计学差异(P＜0.05)，RNAi组在再灌后1d、3d有统计学差异(P＜0.05)，SHD+RNAi组在再灌后3d有统计学差异（P＜0.05）;(2)与I/R组比较，SHD组和SHD+Vec组在再灌后1d、3d、7d脑组织含水量均有统计学意义、（P＜0.05），RNAi组和SHD+RNAi组在再灌后6h、1d、3d、7d脑组织含水量均有统计学差异（P＜0.05）;(3)与SHD组或SHD+Vec组比较，SHD+RNAi组在再灌后6h、1d、3d脑含水量均有统计学意义(P＜0.05);(4)与RNAi组比较，SHD+RNAi组仅在再灌后3d有统计学差异(P＜0.05)。 3.AQP4表达变化:再灌注后6h，病灶侧海马组织AQP4的蛋白含量即有升高，在第3d达到高峰，随后开始下降，直至第14d仍稍高于正常水平。(1)与Sham组比较，SHD+RNAi组在再灌后1d、3d海马组织AQP4的蛋白含量有统计学差异(P＜0.05)，余5组在各时间点均有统计学意义(P＜0.05);(2)与I/R组比较，SHD组和SHD+Vec组在再灌后3d、7d海马组织AQP4的蛋白含量有统计学差异（P＜0.05），RNAi组在再灌后6h、1d、3d、7d海马组织AQP4的蛋白含量有统计学意义(P＜0.05)，SHD+RNAi组在各时间点均有统计学意义（P＜0.05）;(3)与SHD组、SHD+Vec组或RNAi组比较，SHD+RNAi组在再灌后各时间点AQP4的蛋白含量均有统计学意义(P＜0.05)。 结论: 1.三化汤可改善缺血/再灌注后大鼠模型神经功能缺损症状，降低脑组织含水量，减少缺血灶周脑组织AQP4的表达。 2.侧脑室注射AQP4-siRNA后，三化汤可以更加明显地改善神经行为学功能和脑水肿，进一步明确了其神经保护机制的靶点是通过下调AQP4表达实现的。