心理疲劳（Mental fatigue）,又有学者称为心理耗竭（Burnout）,是指持续性的认知要求任务导致认知资源枯竭的一种状态。即体力工作强度不大,但持续的脑力工作或者重复单一工作,长时间处于高度紧张状态,从而引发行为活动能力的减退以及疲乏感和异常情绪。在认知方面表现为注意水平减弱、思维迟缓、记忆力下降等;在情绪方面表现出厌烦、不情愿等消极情绪;国内文献报道心理疲劳者还会表现出怠惰、腹泻、厌食、身体灵活性降低等,病情迁延还会引发身体机能减退,引发失眠、偏头痛、荨麻疹、月经失调等多种身心疾病。至今心理疲劳的概念未有统一的标准,病因病机尚不明确。因此,本课题通过对心理疲劳的中医病机研究,明确其“肝郁脾虚”的核心病机。同时通过梳理国内外心理疲劳动物模型制作方法,筛选出最佳制作方案,复制心理疲劳动物模型,明确体复康加减方对模型动物行为学及中枢神经兴奋-抑制平衡系统的调控作用,探索其神经生理机制,为预防和治疗心理疲劳提供思路和方法。理论一 中医对心理疲劳的认识通过分析心理疲劳的致病因素及临床特点,将心理疲劳归于中医“倦”、“劳神”的范畴,偏重于精神方面的表现,归于“七情”范畴。持续单一工作或高强度脑力工作引起认知功能下降、负性情绪等诸多变化与中医心、肝、脾三脏关系密切,其核心病机是肝郁脾虚,肝郁与脾虚互相影响,加重病情。因此,本病当从肝脾论治,以疏肝健脾,理气解郁为治则,选用体复康加减方进行治疗研究。理论二 心理疲劳动物模型制备方法的文献研究通过对国内外心理疲劳动物模型相关文献进行整理归纳,总结目前模型建立方法包括:电休克发作实验+圆筒束缚法、圆筒束缚法、力竭游泳法、水笼法、水笼+力竭游泳法、跑台运动法、水环境小平台站立法。依据统计结果显示出现频次最多的模型建立方法是水环境小平台站立法。水环境小平台站立法利用大鼠的恐水特性,通过睡眠剥夺影响大鼠的认知功能以及负性情绪变化与心理疲劳临床表现最为贴切。但对于水环境小平台法建立心理疲劳动物模型,其造模对象、造模强度及造模装置等问题无法统一,有待实验论证。实验一 MMPM睡眠剥夺对大鼠一般情况及行为学实验的影响目的:观察连续72小时、96小时、120小时、144小时、168小时改良多平台站立法（MMPM）对大鼠行为的影响,筛选最佳心理疲劳动物模型造模强度。方法:采用一般观察、体重测量及高架迷宫试验、被动回避反应试验、抓力测试评估大鼠的行为变化。结果:①一般体征变化:造模期间,正常组一般情况良好,模型组出现脱毛、便稀、焦虑、警惕性高、易激惹、撕咬等表现,且随造模时间的延长以上症状程度加重。造模144小时后出现死亡,截止168小时造模结束时,168h组大鼠67.7%死亡。②体重变化:造模期间,随时间延长,正常组体重增加,模型组体重减轻,相同时间点各模型组间体重无统计学差异。③高架迷宫测试:较正常组,72h组、96h组、120小时组进入开放吊臂时间显著增加（p<0.05）,144h组极显著增加（p<0.01）。各模型组中央格停留时间缩短,进入吊臂总次数增加,72h组增加显著（p<0.05）。④被动回避反应试验:较正常组,除144h小时组大鼠外,各模型组大鼠潜伏期显著缩短（P<0.01）,错误反应积分有增大的趋势。⑤抓力测试:较正常组,各模型组抓力值减小,96h组有显著性差异（p<0.05）,144h组有极显著性差异（p<0.01）。结论:MMPM睡眠剥夺造模法可引起大鼠认知功能下降、出现负性情绪以及肌肉疲劳,72小时造模强度大鼠风险评估、决策能力差异最为明显,同时表现出学习记忆力能力下降、焦虑以及肌肉疲劳,与心理疲劳临床表现最为贴切。实验二体复康加减方对心理疲劳大鼠一般情况及认知功能的影响目的:复制心理疲劳动物模型,通过行为学评价,观察体复康加减方对大鼠认知功能的影响。方法:MMPM72小时睡眠剥夺复制心理疲劳动物模型,同时对大鼠药物干预,观察各组大鼠的一般情况、体重、高架迷宫试验、被动回避反应试验的变化。结果:①一般体征变化:造模期间,对照组一般情况良好,模型组毛发直立散乱无光泽、摄食减少,站立扶壁次数增多,有试图跳出水箱的举动,警惕性增高、相互之间偶有对峙行为出现,中药低剂量组与模型组比较差异不明显。其余三组以上各种症状减轻。②体重变化:造模期间,随时间延长,正常组体重增加,模型组及各用药组体重减轻,模型组与各用药组间无统计学差异。③高架迷宫测试:与对照组比较,模型组进入开放吊臂时间延长（p<0.01）;较模型组,西药组和中药中剂量组显著缩短了进入开放吊臂的时间（p<0.05）,中药高剂量组则极显著的缩短了进入开放吊臂的时间（p<0.01）,同时延长了中央区域停留时间（p<0.05）。④被动回避反应试验:与对照组比较,模型组潜伏期缩短（p<0.01）,与模型组比较,中药高剂量组潜伏期显著延长（p<0.05）,错误反应积分各组间无统计学差异。结论:心理疲劳动物模型复制成功,且体复康加减方可改善心理疲劳大鼠的主观风险评估能力、决策能力及学习记忆能力。实验三体复康加减方对心理疲劳模型大鼠纹状体内氨基酸递质的影响目的:研究体复康加减方对心理疲劳模型大鼠认知下降与纹状体内氨基酸递质的影响,探讨药物作用机制。方法:取实验二大鼠纹状体组织,采用高效液相电化学检测法检测Glu、GABA含量。结果:与对照组比较,模型组纹状体Glu、GABA水平升高（p<0.01）,西药组和中药高剂量组可明显降低二者水平（p<0.01）。结论:体复康加减方可能通过调节纹状体内Glu、GABA含量的变化,保持两者的动态平衡从而改善认知能力。实验四体复康加减方对心理疲劳模型大鼠GABA能系统相关指标基因表达的影响目的:观察心理疲劳对大鼠纹状体GABA能系统相关指标基因表达的影响以及体复康加减方对其的调节作用。方法:采用RT-PCR技术,观察实验二大鼠纹状体中GABA能系统相关指标基因表达情况。结果:经过MMPM睡眠剥夺造模后,大鼠纹状体内GABA合成因子GAD67、GABA代谢的调节分子GAT-1、GAT-3表现出异常改变。较对照组,模型组GAD67、GAT-3mRNA转录水平极显著升高（p<0.01）,GAT-1显著升高（p<0.05）。GABAAα5受体mRNA转录水平极显著下降（p<0.01）。药物干预对于模型组各项指标的异常变化都有不同程度的改善。其中,中药高剂量组显著性上调了GAD67、GAT-1基因的表达水平。西药组、中药高剂量组、中药中剂量组对于上调GAT-3的基因表达水平与模型组有显著性差异（p<0.05、p<0.01、p<0.01）,同时这三组显著性上调了 GABAAα5基因水平（p<0.05）。中药低剂量组对于改善各项指标的调节作用不具有统计性差异。结论:体复康加减方通过调控GABA的合成代谢途径,可以维持MMPM睡眠剥夺刺激后大鼠GABA的关键性合成酶GAD67mRNA及转运蛋白GAT-1、GAT-3mRNA转录的正常水平,同时还可抑制GABAAα5受体mRNA的表达水平,降低了 GABA抑制效应,将Glu-GABA平衡维持在正常水平范围内,保护心理疲劳大鼠认知功能不受到损害。小结综合以上结论可知:一、心理疲劳核心病机是肝郁脾虚,提出疏肝健脾,理气解郁的治疗原则。二、确定MMPM睡眠剥夺72小时建立心理疲劳动物模型的方法。三、体复康加减方通过调控GABA转运代谢途径,抑制GABA与GABAA受体的特异性结合从而调节Glu-GABA动态平衡,改善心理疲劳大鼠认知功能,验证了肝郁脾虚的核心病机。