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目的：采用双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis，2-DE)结合MALDI-TOF-MS质谱分析技术比较同时放化疗高敏感和低敏感中晚期宫颈癌组织之间蛋白质组的差异，识别和鉴定高敏感组和低敏感组之间差异表达的蛋白质，初步确定中晚期宫颈癌同时放化疗敏感性相关的蛋白质，为中晚期宫颈癌患者同时放化疗敏感性的预测提供理论依据。方法：收集治疗前的中晚期宫颈癌组织标本，病理诊断均为中分化鳞状细胞癌，置于—80℃超低温冰箱保存。在进行同时放化疗后，根据WHO实体瘤疗效判断标准，将收集的宫颈癌组织标本10例分为高敏感组(5例)和低敏感组(5例)。提取组织总蛋白，采用2-DE分离蛋白质，得到高敏感组和低敏感组的2-DE图谱，采用PD-quest 7.0软件进行匹配和差异分析，识别两组之间表达差异蛋白点。从胶中切取差异蛋白点进行胶内原位酶解、酶解产物进行MALDI-TOF-MS分析，获取肽质量指纹图，数据库搜索鉴定蛋白质。应用Western Blot方法检测其中4个差异表达蛋白在以上10例宫颈癌组织标本中的表达，观察它们在高敏感组和低敏感组中的表达是否与蛋白质组学方法检测结果一致。进一步收集同时放化疗疗效不同的宫颈癌组织标本，其中高敏感组60例，低敏感组35例，应用免疫组化技术检测这4种差异表达蛋白在宫颈癌组织中的表达并分析其临床病理意义。结果：建立了分辨率高，重复性好的宫颈癌同时放化疗高敏感组和低敏感组的双向凝胶电泳(2-DE)图谱。高敏感组蛋白点数为781±74个，低敏感组蛋白点数为766±52个，组间平均匹配率为87.6％。选择部分差异在2倍以上的蛋白斑点进行质谱分析、19个差异表达蛋白被成功鉴定，其中9个蛋白质在高敏感组高表达：血红蛋白β亚单位、Caspase-14前体、钙调节蛋白、S100-A9蛋白／MRP-14蛋白、半乳凝素7、HSKERC4、角蛋白19、肌动蛋白；10个蛋白质在高敏感组低表达：乙型肝炎表面(抗体)轻链片段、核纤层蛋白-B1、WARS蛋白、黄素还原酶、谷氨酸脱氢酶1、NMP238、视黄醛脱氢酶1、AF165172、复制型DNA多聚酶亚单位、HSP70。免疫印迹和免疫组织化学结果显示：HSP70和NMP238在低敏感组中的表达率显著高于高敏感组，而S100-A9蛋白／MRP-14蛋白和半乳凝素7在高敏感组中的表达率显著高于低敏感组，这一结果与蛋白质组学研究结果一致。结论：本研究应用2-DE技术获得了同时放化疗高敏感组和低敏感组宫颈癌组织的蛋白质2-DE图谱，质谱鉴定了19个差异表达的蛋白质；部分差异蛋白质经免疫组化和Western blot验证，这些差异表达的蛋白可能与同时放化疗敏感性有关，可望作为同时放化疗敏感性预测的侯选标志物。