在对自建的家蚕蛹期cDNA文库测序中，我们筛选到一条cDNA序列，GenBank登录号DY231426，通过生物信息学分析，该基因同源性很低，而且也没有发现保守结构域。该基因长度为66.bp，其中5'UTR长9.bp，3'UIR长7.bp，ORF长48.bp，编码161个氨基酸残基，蛋白分子量为18.6.kD，理论等电点为9.461。Unigene分析预测该基因只在蛹期表达，因此，将其命名为pupa-sepecificexpresstio.gene(Bmpseg)。利用生物信息学分析方法预测该基因的蛋白存在跨膜区和信号肽。　　 通过PCR把Bmpseg的ORF扩增后插入到载体PGEX-4T-3的BamHI和Xh.I位点，获得重组表达质粒pGEX-4T-3-Bmpseg，转化大肠杆菌Rosetta，经PCR、酶切鉴定以及测序分析证实重组正确。IPTG诱导后裂解菌作SDS-PAGE分析，在44 kD处有一浓集特异性蛋白条带，与预期值相符。融合蛋白以不溶性的包涵体的形式存在，超声波裂解菌体分离包涵体并离心、洗涤；对包涵体进行溶解和梯度透析复性；采用亲和层析法纯化融合蛋白Bmpseg。以该融合蛋白为抗原免疫新西兰大白兔，制备了Bmpseg多克隆抗体，经Protei HP凝胶柱纯化后，ELISA检测该抗体的效价可达到1:12800。免疫印迹检测显示该抗体对Bmpseg有特异性识别能力。提取五龄蚕脂肪体、马氏管、气管、睾丸、肠、头、丝腺、表皮等不同组织总蛋白和不同发育时期总蛋白，做免疫印迹试验，结果表明该蛋白只在蛹期表达，推测该基因可能是蛹期特异性表达基因。亚细胞定位表明蛋白定位在细胞质。