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背景与目的:骨肉瘤是临床上常见的恶性肿瘤,目前其治疗方式主要是手术联合药物化疗。然而传统化疗药物副作用多,对患者二次伤害巨大,因此寻找低毒的新型天然抗癌药物具有重大意义。早期研究发现茉莉酸甲酯(Methyl Jasmonate,MEJA)在植物界普遍存在且具有重要生理功能,参与细胞生长发育各个过程。目前研究表明MEJA可以抑制多种肿瘤细胞增殖,诱导其凋亡。因此本实验拟采用MEJA联合顺铂(Cisplatin,CDDP)来初步探讨其对人骨肉瘤MG-63细胞增殖抑制作用及作用机制。方法:(1)实验分4个组:空白对照组、MEJA组、CDDP组和MEJA + CDDP药物联合组;(2)采用不同浓度梯度MEJA与CDDP单独及联合作用于MG-63细胞,倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化;(3) Hoechst 33342核染色法及AnnexinV-FITC/Pl流式细胞术检测细胞凋亡率;(4) RT-PCR 检测 Caspase-3、Bcl-2mRNA 表达情况;Western blotting 检测cleaved Caspase-3、Bcl-2在蛋白水平的表达变化。结果:(1)显微镜下见对照组肿瘤细胞生长良好,而各浓度梯度药物组细胞则表现为不同程度的凋亡状态,可见部分细胞脱落降解,贴壁细胞密度降低,部分脱落细胞形态由梭形变圆,变小,细胞间距增大,胞内颗粒增多,镜下见同一浓度梯度中两单药组凋亡细胞数量大致相同,联合组较单药组凋亡细胞数量更为显著,且上述现象随着药物浓度的增加而更加明显;(2) Hoechst 33342核染细胞凋亡荧光检测结果发现:对照组中,肿瘤细胞呈均匀的浅蓝色荧光,而单药组中细胞核呈致密浓染的凋亡特征的肿瘤细胞数量增多,细胞核染成碎块状强白光,联合组效果更显著;(3)流式细胞术检测结果显示:对照组肿瘤细胞凋亡率为8.18± 1.24%,MEJA组肿瘤细胞凋亡率为27.98±2.76%,CDDP组肿瘤细胞凋亡率为31.99土3.6%,MEJA+CDDP药物联合组肿瘤细胞凋亡率为45.77 ±2.76%。两单药组肿瘤细胞凋亡率较对照组高,而联合组肿瘤细胞凋亡率明显高于单药组及对照组;(4) RT-PCR及Western blotting结果表明:药物组较对照组而言,Bcl-2表达量下降而Caspase-3表达量增加,联合组这一现象更为显著。结论:MEJA联合CDDP可以协同抑制MG-63细胞增殖并诱导其凋亡,而MEJA可能是通过下调Bcl-2及上调Caspase-3的表达,实现诱导骨肉瘤MG-63细胞生长抑制和凋亡发生。