背景:冠心病(CAD)是心血管疾病中的常见病和多发病,尤其在当今快节奏的生活状况下,使其成为全球人类死亡和功能障碍的主要原因之一,急性心肌梗死(AMI)是冠心病的危急类型,其最主要发病原因为冠脉不稳定斑块破裂、糜烂基础上继发血栓形成从而导致冠状动脉闭塞。MEF2C基因是MEF2亚家族的成员之一,因其与心脏发育息息相关,被看作是心脏早期发育的重要转录因子之一[1]-[2]基因中的启动子是其必不可少的部分,基因表达过程中启动子序列的变异,可影响基因表达水平。因此,我们通过研究MEF2C基因启动子的遗传及功能变异情况,来探讨其与心脏早期发育异常和心肌梗死发生的关系。目的:研究急性心肌梗死病人及健康人群的MEF2C基因启动子的序列变异,构建表达载体,检测表达水平的变化,探讨该基因在AMI中的发病机制。方法:1、本研究所用的全基因组DNA提取自406例AMI病例及422例健康对照人群的白细胞,统计被研究者临床一般资料。2、根据NCBI基因数据库中MEF2C基因的启动子序列,然后设计引物,通过PCR仪扩增目片段,进而测序发现变异位点。将MEF2C启动子野生型目的片段及序列变异位点构建至PGL3-basic报告基因载体,然后通过脂质体瞬时转染方法将构建的报告基因载体与内参质粒PRL-TK共转染至人胚肾细胞(HEK293细胞)及大鼠心肌细胞(H9 C2细胞)中,检测荧光素酶活性。3、合成AMI组中变异位点处正常序列及变异序列的生物素标记探针序列,通过EMSA检测转录因子结合的改变。结果:1、通过测序发现11个DSVs,仅在AMI组的发现2个新的杂合DSVs:g.8888-4584G>A、g.88883666C>G,及一个 SNP 位点:g.88884379A>G(rs114694170),仅在对照组中发现 3 个杂合 DSVs:g.88884127G>C、g.88884117G>C、g.88883924G>T 及 2个 SNPs:g.88884426C>A(rs777237657)、g.88884274G>A(rs137991329),在 AMI 组和对照组中均发现的 DSVs 包括 3 个 SNPs:g.88884587G>T(rs3814288)、g.88883758T>C(rs80043958)、g.8888351-9C>T(rs78821200),但无统计学意义。2、通过检测转染之后的HEK293细胞及H9C2细胞双荧光素酶活性,发现仅在AMI组中存在的DSVs可显著降低MEF2C启动子的转录活性(P<0.01),只在对照组中存在的DSVs其并未明显改变MEF2 C基因启动子的转录活性(P>0.05)。3、EMSA实验检测发现:AMI组中g.88883666C>G可能消除了转录因子PPARG::RXRA、YY1 等转录因子等结合。g.88884379A>G(rs114694170)可能减弱了SP1B、NFATC2等转录因子结合。g.88884584G>A通过EMSA实验未发现明显改变。结论:MEF2C基因启动子的序列变异可能改变MEF2C基因的转录活性,以及改变相关转录因子的结合或影响相关转录因子结合效率,在心肌梗死的发生发展中有极其重要作用。