目的：　　 研究TSC2基因与RB基因在不同表型的血管平滑肌细胞(VSMC)中的表达情况,探讨VSMC的表型是否与RB基因及TSC2基因的协同表达具有相关性。　　 方法：　　 体外培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞,并用血管平滑肌特异性抗体α-SM-actin进行免疫荧光鉴定;实验选用第3-8代细胞。待细胞长至70%融合时,给予无血清培养基同步化细胞,同步化48h后,一组继续给予无血清培养基培养24h(模拟收缩型VSMC表型),另一组给予含10%胎牛血清培养基培养24h,并加入血管平滑肌刺激因子PDGF(Platelet-DerivedGrowthFactor血小板源性生长因子)(模拟合成型VSMC表型),以模拟体内血管平滑肌细胞的正常和增殖表型。应用RT-PCR,Western-Blot技术检测RB基因和TSC2基因在不同表型的VSMC中的表达情况。　　 结果：　　 1.免疫荧光鉴结果:　　 倒置显微镜下观察VSMC呈梭形,束状排列,胞质丰富,核里圆形或卵圆形,大小不一的核仁,密度较高时呈“峰-谷”状生长。用α-SM-actin进行免疫荧光化学鉴定,证实培养的细胞为VSMC为血管甲滑肌细胞。　　 2.RT-PCR结果显示:　　 合成型VSMC中,R13基因和TSC2的表达均较少,RB基因为内参(GAPDH)的(0.24±0.03)倍,TSC2基因为内参(GAPDH)的(0.30±0.04)倍;收缩型VSMC中RB和TSC2基因的表达较多,RB基因为内参(GAPDH)的(0.81±0.02)倍,TSC2基因为内参(GAPDH)的(0.566±0.03)倍。t检验证明这一结果有统计学意义(P<0.05)。　　 3.Western-Blot蛋白印迹结果显示:　　 收缩型VSMC中,RB蛋白和TSC2蛋白的表达均较多;而P-RB蛋白及P-TSC2蛋白的表达均较少。RB蛋白的光密度值为(0.613±0.03),P-RB的光密度值为(0.233±0.02)。TSC2蛋白的光密度值为(0.456±0.01);P-TSC2的光密度值为(0.17±0.04)。　　 合成型VSMC中,RB蛋白和TSC2蛋白的表达均较少;而P-RB蛋白及P-TSC2蛋白的表达均较多。RB蛋白的光密度值为(0.184±0.02),P-RB的光密度值为(0.704±0.03)TSC2蛋白的光密度值为(0.212±0.04),P-TSC2的光密度值为(0.436±0.03)。t检验证明这一结果有统计学意义(P<0.05)。　　 结论：　　 本研究应用RT-PCR技术,Western-Blot技术首次发现了TSC2基因及RB基因在不同表型的VSMC中的表达差异情况,发现在合成型VSMC中RB及TSC2基因的表达均较收缩型VSMC中的表达明显降低,表明TSC2基因与RB基因的协同表达与细胞增殖周期的调控密切相关,说明RB基因和TSC2基因的低表达与VSMC的增殖具有密切关系。